[發明專利]一種新的多肽——熱休克因子結合蛋白111.88和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00125568.1
• 申請日: 2000-09-29
• 公開（公告）號: CN1345765A
• 公開（公告）日: 2002-04-24
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P43/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——熱休克因子結合蛋白111.88，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

細胞對于外界壓力的反應是通過一個嚴格調控的蛋白家族誘導的，這些蛋白稱為熱休克蛋白。初生的多肽在合成、折疊和轉位過程中會受到許多有還的外界壓力的影響，熱休克蛋白家族的成員能夠有力地對付這些不利因素的影響，并且防止錯誤折疊的蛋白聚合在一起(Lindquist?and?Craig，1988；Gething?andSambrook，1992)。當外界環境和生理條件發生變化時，熱休克蛋白基因的表達也隨之發生改變，這需要熱休克因子(HSF)的介導。熱休克因子是一種可誘導的轉錄活化因子，能夠在從酵母到人類的所有生物體中廣泛表達，是可誘導的轉錄反映所必不可少的(Lis?and?Wu，1993；Morimoto，1993)。熱休克因子結合蛋白1(HSBP1)能夠與HSF1三聚體相互作用，對于HSF1的活性具有負調控作用。

HSF1以兩種形式存在，即單聚體和三聚體形式。當惰性的非DNA結合單聚體被活化為功能性的HSF1三聚體中的時候，空間構象發生了轉變，為了對因而產生的壓力作出反應，熱休克因子1(HSF1)需要快速的DNA結合和瞬間轉錄活性。當在非壓力狀態下或者HSF1三聚體分離并且失去活性的狀態下，可誘導的轉錄反應發生衰減。

HSBP1蛋白共含有76個氨基酸殘基，包含2條延伸的疏水性重復子序列結構，它們能夠與HSF1七價重復子相互作用。HSBP1蛋白位于細胞核內，當發生熱休克時在體內與三聚體狀態的活性HSF1反應。當HSF1恢復為單聚體時，HSBP1能夠與Hsp70相結合。HSBP1對于HSF1的DNA結合活性產生負調節作用，在哺乳動物細胞中，HSBP1的超表達遏制了HSF1的轉活活性。HSBP1表達水平的變化對于經受了熱和化學作用并且受到損傷的動物的繼續存活具有至關重要的影響，這與HSBP1對于熱休克反應的負調節作用是一致的。

通過基因芯片的分析發現，在胎腦、原液培養的L02細胞株、0.5％FBS培養液37.C饑餓的L02細胞株、胎腎、直腸癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睪丸、胎胃、成人胃中，本發明的多肽的表達譜與熱休克因子結合蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為熱休克因子結合蛋白111.88。

由于如上所述熱休克因子結合蛋白111.88蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的熱休克因子結合蛋白111.88蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新熱休克因子結合蛋白111.88蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——熱休克因子結合蛋白111.88以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼熱休克因子結合蛋白111.88的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼熱休克因子結合蛋白111.88的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產熱休克因子結合蛋白111.88的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——熱休克因子結合蛋白111.88的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——熱休克因子結合蛋白111.88的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與熱休克因子結合蛋白111.88異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。