[發(fā)明專利]一種新的多肽——核糖體蛋白L3235.2和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00125537.1
• 申請日: 2000-09-29
• 公開（公告）號: CN1345757A
• 公開（公告）日: 2002-04-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——核糖體蛋白L3235.2，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

核糖體是合成蛋白質(zhì)的細(xì)胞器，其唯一的功能是按照mRNA的指令由氨基酸合成多肽鏈。在核糖體的大小亞基上分布著許多蛋白質(zhì)，在不同原核生物或真核生物中這些蛋白質(zhì)都是高度保守的，并且行使著較為復(fù)雜的功能。同時對真核生物和原核生物核糖體蛋白進(jìn)行分析，找到一些序列上的相似區(qū)域，這就表明了在生物體進(jìn)化過程中，核糖體蛋白是較為保守的(Tanaka，T.，Wool，I.G.，andStoffler，G.，1980)。真核生物核糖體含有多于70種的蛋白質(zhì)，這些蛋白質(zhì)的性質(zhì)基本相同，當(dāng)從核糖體分離時，它們趨于沉淀下來，某些則可以在核糖體純化中丟失。雖然核糖體結(jié)構(gòu)功能非常復(fù)雜，但目前一部分核糖體蛋白的一些特性已經(jīng)得到了闡述。核糖體蛋白L32基因家族蛋白是位于核糖體大亞基上的一族結(jié)構(gòu)相近并且發(fā)揮相似功能的蛋白質(zhì)。

至少存在16個基因編碼鼠的核糖體蛋白L32，但是值得注意的是，該家族只包含一個能夠單一表達(dá)的內(nèi)含子包含基因，稱為rpL32。rpL32具有獨(dú)特的特點(diǎn)，包括存在于其兩個內(nèi)含子中的一段序列，高度同源于Ul?snRNA的5’末端，還有一個嘧啶異常豐富的5’末端區(qū)域。L32蛋白家族的其它蛋白是加工過的基因，它們中的一些與rpL32基因相同或者非常相似，除了缺少內(nèi)含子序列以外。在鼠的核糖體蛋白L32家族中，存在一個加工過的基因L32’，能夠編碼一條包含135個氨基酸的蛋白，幾乎與rpL32相同。該基因的5’側(cè)序列區(qū)域包含CAAT和TATA位點(diǎn)，位于與通常表達(dá)基因相同的位置。

rpL32基因的表達(dá)受到一些因素的調(diào)節(jié)，一些蛋白以及促進(jìn)子都能夠影響其表達(dá)。比如GABP蛋白，通過過轉(zhuǎn)錄修正對rpL32產(chǎn)生調(diào)節(jié)作用。當(dāng)存在GCC-因子時，rpL32促進(jìn)子片段能夠與鼠和人的核蛋白形成特異性復(fù)合物。

通過基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在胎腦、原液培養(yǎng)的L02細(xì)胞株、0.5％FBS培養(yǎng)液37.C饑餓的L02細(xì)胞株、胎腎、直腸癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睪丸、胎胃、成人胃中，本發(fā)明的多肽的表達(dá)譜與核糖體蛋白L的表達(dá)譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為核糖體蛋白L3235.2。

由于如上所述核糖體蛋白L3235.2蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的核糖體蛋白L3235.2蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新核糖體蛋白L3235.2蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽——核糖體蛋白L3235.2以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼核糖體蛋白L3235.2的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼核糖體蛋白L3235.2的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產(chǎn)核糖體蛋白L3235.2的方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽——核糖體蛋白L3235.2的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽——核糖體蛋白L3235.2的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與核糖體蛋白L3235.2異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中28-990位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-1665位的序列。