[發明專利]一種新的多肽——人軟骨連接蛋白13.86和編碼這種多肽的多核苷酸無效

申請號：	00125329.8	申請日：	2000-09-22
公開（公告）號：	CN1345782A	公開（公告）日：	2002-04-24
發明（設計）人：	毛裕民;謝毅	申請（專利權）人：	上海博德基因開發有限公司
主分類號：	C07K14/435	分類號：	C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P19/08;A61P43/00
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種多肽軟骨連接蛋白 13.86 編碼這種多核苷酸
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【說明書】：

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人軟骨連接蛋白13.86，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

多糖聚集對軟骨的彈性起關鍵作用。蛋白多糖由透明質酸的長鏈構成，與許多蛋白多糖單體相連。這種相互作用可以被連接蛋白，透明質酸鹽等所穩定。連接蛋白僅僅在軟骨細胞和其他軟骨組織中存在，并且往往存在于軟骨的細胞外基質中。在發育過程中，未成熟的軟骨組織中的連接蛋白的mRNA的量比在成熟的軟骨組織中的量高。【Biochem?J.1996?Oct?15；319(Pt2)：489-98.】因此，軟骨細胞的成熟的表型的變化與連接蛋白的表達量有關。

缺乏連接蛋白的小鼠矮小而且顱面異常。【Nat?Genet.1999Feb；21(2)：225-9】連接蛋白還可能與瓦格納綜合癥(Wagner?syndrome)有關。該癥患者患有嚴重的脈絡膜萎縮，白內障和視網膜脫落等癥狀。【Genomics.1999Apr?15；57(2)：219-26】

通過基因芯片的分析發現，在胎腦、原液培養的L02細胞株、0.5％FBS培養液37.C饑餓的L02細胞株、胎腎、直腸癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睪丸、胎胃、成人胃中，本發明的多肽的表達譜與人軟骨連接蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人軟骨連接蛋白13.86。

由于如上所述人軟骨連接蛋白13.86蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人軟骨連接蛋白13.86蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人軟骨連接蛋白13.86蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人軟骨連接蛋白13.86以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人軟骨連接蛋白13.86的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人軟骨連接蛋白13.86的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人軟骨連接蛋白13.86的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人軟骨連接蛋白13.86的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人軟骨連接蛋白13.86的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人軟骨連接蛋白13.86異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；