[發明專利]一種新的多肽——人L1因子ORF2反轉錄相關蛋白14.63和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00125230.5
• 申請日: 2000-09-19
• 公開（公告）號: CN1343701A
• 公開（公告）日: 2002-04-10
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人L1因子ORF2反轉錄相關蛋白14.63，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

靈長類動物和嚙齒動物基因組中包含一個L1家族，有高度重復的、長的并且交替出現的序列，這個家族的序列特征是在3’-末端有一段富含A的序列，5’-末端是平末端結構，區別于一般的粘性末端結構，但是并不影響其轉錄整合過程，并且有較長的開放閱讀框(ORFs)存在。L1家族成員存在于不同類型的細胞中，其中包括多功能胚胎細胞，這就證明了L1家族起源于同一種序列編碼蛋白，通過一個RNA介導的過程散布到基因組中。L1家族參與反轉錄過程，反轉錄起始于3’-末端，終止于互補DNA插入物引起的重疊位點，它能夠通過轉錄轉換成cDNA，然后經過類似于假基因加工的過程插入到染色體中。

在人類的基因組中，L1因子存在于染色體1q的LRE2上。在結構上，L1因子沒有很長的末端重復序列，其3’-末端的多聚A尾巴比較特殊，而且它并不是在每個L1因子上都固定不變。L1因子的增殖過程包括轉錄、反轉錄和再整合到基因組上的一個新的位點。L1因子的5’末端大多是平端結構，區別于一般的粘性末端結構，但是并不影響其轉錄整合過程。5’末端的非翻譯區域(UTR)含有一個內在的促進子，對于整個逆轉錄過程的速度進行調節和控制。LRE2位點含有兩個完整的開放閱讀框(ORF1框和ORF2框)，其中的ORF1框編碼一個大約40Kd的胚胎癌細胞蛋白，ORF2框與逆轉錄酶和其它逆轉錄酶病毒蛋白有序列上的相似性，能夠介導逆轉錄過程的進行。采用實驗手段去除L1因子最前面的32Bp，得到的產物只能顯示出正常轉錄效率的20％。

L1家族序列的一個開放閱讀框與某些病毒的依賴RNA的DNA聚合酶有相似之處，更進一步證明了L1家族或者它的祖先與反轉錄酶有關，它編碼的蛋白實際上是一種類反轉錄酶。

本發明的多肽與上述的L1因子的ORF2類反轉錄酶區域有81％的相同性，87％的相似性，并且包含了其特征性的保守序列，因此認為此蛋白是一種新的L1因子ORF2相關的類反轉錄酶，具有與反轉錄酶的一些生物學功能，并命名為。

由于如上所述人L1因子ORF2反轉錄相關蛋白14.63蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人L1因子ORF2反轉錄相關蛋白14.63蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人L1因子ORF2反轉錄相關蛋白14.63蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人L1因子ORF2反轉錄相關蛋白14.63以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人L1因子ORF2反轉錄相關蛋白14.63的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人L1因子ORF2反轉錄相關蛋白14.63的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。?

本發明的另一個目的是提供生產人L1因子ORF2反轉錄相關蛋白14.63的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人L1因子ORF2反轉錄相關蛋白14.63的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人L1因子ORF2反轉錄相關蛋白14.63的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人L1因子ORF2反轉錄相關蛋白14.63異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少82％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中1153-1554位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-1775位的序列。