[發明專利]利用轉基因番茄生產人胰島素的方法無效
| 申請號: | 00122802.1 | 申請日: | 2000-08-25 |
| 公開(公告)號: | CN1295129A | 公開(公告)日: | 2001-05-16 |
| 發明(設計)人: | 林忠平;陳溪;胡鳶雷;高音;倪挺 | 申請(專利權)人: | 林忠平 |
| 主分類號: | C12N15/87 | 分類號: | C12N15/87;C12N15/63;C07K14/62 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 利用 轉基因 番茄 生產 胰島素 方法 | ||
1、本發明為番茄果實生產人胰島素的方法。該方法利用人工合成的外源的人胰島素基因在
番茄中在果實專一性啟動子或其他高效表達啟動子的驅動下表達,這時包含了人胰島素
基因通過轉基因的途徑導入番茄,并在果實和其它可食用部位大量表達。這種外源導入
的基因存在于適當的親本中,再傳遞到子代(F1代),與此同時利用定位重組系統使這種
產生人胰島素的基因轉錄單位在F2代被刪除掉或且利用激素調控基因(如iaa?M基因,ipt
基因)或某種可致死的基因(如某種RNase基因)阻止F2代種子的正常發育。這種人胰
島素基因表達的植物,應不僅限于番茄,應可擴展到其它蔬菜類和瓜果類作物如黃瓜、
西瓜、甜瓜、茄子、黃瓜、南瓜等。還應擴展到其它水果類植物,如香蕉、蘋果、梨、
菠蘿等。還應擴展到塊根、塊莖類植物,如胡羅卜、蘿卜、甘薯、木薯、馬鈴薯等。
2、權利要求第1項中關于人工合成的人胰島素基因。該基因的人工合成,將不僅限于植物
偏愛的密碼子的使用(包括單子葉植物偏愛密碼子的使用和雙子葉植物偏愛密碼子的使
用),應擴展到有利于表達量提高及更有效的人胰島素基因結構的改造。
3、權利要求2中關于基因結構的改造應擴展到關于人胰島素A鏈與B鏈之間的連接關系。
包括A鏈和B鏈之間自主的斷裂結構的設計,以及將A鏈和B鏈編碼順序分別放在不
同的轉錄單位之中。
4、權利要求1所涉及啟動子的應用不僅限于番茄果實專一性啟動子,也包括其它器官中高
水平表達的啟動子,如塊莖根或其它貯藏器官(如種子)可大量表達的啟動子,雖然不
是專一性表達的啟動子。
5、權利要求1的敘述中關于定位重組系統的應用包括Cre-lox、FLP-FRT、R-RS及Gin-gix
四種定位重組系中單獨應用一種系統也包括不同種定位重組系統的配合應用。
6、權利要求1中不僅涉及番茄一種植物。在應用于番茄時,我們已采用的實施方案中將
外源基因置于不同的親本中,通過雜交一代(F1)來獲得商業應用的胰島素。在不同植
物中應用時,將不限于把外源基因分置于兩個親之中,可以把外源基因同時或先后置于
同一植株中,再通其它基因調控途徑,達到高效的可調控的制造人胰島素。
7、權利要求1和5的敘述中涉及控制人胰島素基因在F2代種子中不能被再利用的方法。
種子不是唯一的繁殖器官。這種通過定位重組系統刪除特定目標DNA的方法,應可延伸???到其它的組織和器官。
8、權利要求1和4。在采用激素調控基因或導致植物組織衰退的基因(如RNase基因)???時,也不應限于在種子部位的表達,應包括其它一些器官(如芽或再生芽)的表達。
9、權利要求1提到的人工合成的人胰島素基因的表達產物。這種基因表達產物應擴展到???對人胰島素受體部位起作用的人胰島素類似物或其它多肽產物。
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