[發明專利]生產L－賴氨酸的棒狀菌和制備賴氨酸的方法

有效

• 申請號: 00120357.6
• 申請日: 2000-07-07
• 公開（公告）號: CN1280185A
• 公開（公告）日: 2001-01-17
• 發明（設計）人: 卡羅琳·克羅伊策;貝蒂娜·默克爾;瓦爾特·普費弗勒;洛塔爾·埃格林;赫爾曼·扎姆;米羅斯拉夫·帕特克
• 申請（專利權）人: 德古薩－于爾斯股份公司;于利希研究中心有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P13/08;C12P19/34;//;C12R115)
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司
• 代理人: 林曉紅

1．生產L-賴氨酸的棒狀菌，其具有擴增的pyc基因，在這些菌株中，選自包括dapA基因，lysC基因，lysE基因和dapB基因的組的附加基因分別或一起得到擴增，尤其是得到超量表達。

2．如權利要求1中所要求的棒狀菌，其中dapA基因及任選地dapB基因得到擴增，尤其是得到超量表達。

3．如權利要求1中所要求的棒狀菌，其中dapA基因，dapB基因以及lysE基因得到擴增，尤其是得到超量表達。

4．如權利要求1中所要求的棒狀菌，其含有SEQ?ID?No．5和SEQID?No．6中所示的dapA啟動子的MC20或MA16突變。

5．如權利要求1中所要求的棒狀菌，其中dapB基因得到擴增，尤其是得到超量表達，該基因額外含有SEQ?ID?No．1中所示的其翻譯起始位點上游的5’末端。

6．優選地為重組的DNA，其來源于棒狀菌，并且能夠在棒狀菌中復制，該DNA至少含有額外包含SEQ?ID?No．1中所示的dapB基因翻譯區5’末端上游的核苷酸序列。

7．如權利要求5中所要求的能夠復制的DNA，其具有SEQ?ID?No．1中所示的核苷酸序列。

8．一種通過發酵具有擴增的pyc基因的棒狀菌制備L-賴氨酸的方法，其中使用這樣的細菌，該細菌中編碼選自dapA，lysC，lysE和dapB基因的核苷酸序列分別或一起得到擴增，尤其是得到超量表達。

9．如權利要求8的方法，其中使用這樣的細菌，該細菌中dapA基因得到擴增，尤其是得到超量表達，任選地lysC基因也同時得到擴增，尤其是超量表達。

10．如權利要求8的方法，其中使用這樣的細菌，該細菌中dapA基因，dapB基因以及lysE基因同時得到擴增，尤其是得到超量表達，

11．如權利要求8的方法，其中使用由一種或多種質粒載體轉化的菌株，所說的質粒載體攜帶有待擴增的一種或多種基因的核苷酸序列。

12．如權利要求8的方法，其中使用由一種或多種質粒載體轉化的菌株，所說的質粒載體攜帶有編碼選自pyc，dapA，dapB和／或lysE基因的一種或多種基因的核苷酸序列。

13．如前述一或多項權利要求所要求的方法，其中使用谷氨酸棒桿菌菌種的細菌。

14．如前述一或多項權利要求所要求的通過發酵制備L-賴氨酸的方法，該方法包括以下步驟：

a)發酵L-賴氨酸生產菌，在這些細菌中，所描述的基因得到了擴增，

b)在培養基中或在細菌細胞中富集L-賴氨酸，和

c)分離L-賴氨酸。

15．大腸桿菌K-12菌株DH5α/pEC7lysE，保藏號為DSM12871。

16．大腸桿菌K-12菌株DH5α／pEC7dapBlysE，保藏號為DSM12875。

17．谷氨酸棒桿菌菌株DSM5715／pJC23，保藏號為DSM12869。

18．谷氨酸棒桿菌菌株DSM5715aecD∷dapA(MA16)，保藏號為DSM12867。

19．谷氨酸棒桿菌菌株DSM5715aecD∷dapA(MC20)，保藏號為DSM12868。

20．谷氨酸棒桿菌678菌株，保藏號為DSM12866。

21．能夠復制的DNA，具有SEQ?ID?No．5中所示的核苷酸序列MC20。

22．能夠復制的DNA，具有SEQ?ID?No．6中所示的核苷酸序列MA16。