[發明專利]一種新的多肽——人S4核糖體蛋白13.97和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00117077.5
• 申請日: 2000-07-07
• 公開（公告）號: CN1333268A
• 公開（公告）日: 2002-01-30
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人S4核糖體蛋白13.97，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

核糖體是合成蛋白質的細胞器，其唯一功能是按照mRNA的指令由氨基酸合成多肽鏈，它被稱為核糖核蛋白體，簡稱為核蛋白體或核糖體。核糖體幾乎存在于一切細胞內，無論原核還是真核細胞，均有大量的核糖體存在。核糖體是一種顆粒狀結構，沒有膜包裹，其直徑為25nm，主要成分為蛋白質和RNA，核糖體RNA稱為rRNA，蛋白質含量約占40％，RNA約占60％。蛋白質分子主要分布在核糖體的表面，而rRNA則位于內部，兩者靠非共價鍵結合在一起。(細胞生物學翟中和高等教育出版社pp122-129)核糖體的功能研究將焦點放到了核糖體RNA上，有很多rRNA功能域決定著核糖體的不同功能。(Annu?Rev?Biochem?1991；60?191-227)

S4是最重要的核糖體蛋白之一，它是原核生物小亞單位30S的一種結合蛋白，同樣它在真核生物中也有人S4核糖體蛋白，行使相同的生物學功能。在細菌和葉綠體中均有S4的表達，在酵母、高等植物、動物體內也發現有S4及其人S4核糖體蛋白。

對核糖體蛋白S4晶體研究(由于S4的N末端有41個不易結晶的氨基酸，因此切除此41個氨基酸殘基的剩余部分的結晶，稱為S4delta-41)的結果表明，S4delta-41有兩個功能域，功能域1都是alfa螺旋結構，功能域2含有5個平行的beta折疊結構和3個alfa螺旋結構。功能域2是插入在功能域1之中的，功能域2還與真核生物轉錄因子的ETS功能域同源。從結構上看，S4的二級結構的序列為α1-α2-α3-α4-α5-β1-β2-β3-α6-β4-β5-α7，其中功能域1全是α螺旋(α1-α2-α3-α7)，功能域2是α4-α5-β1-β2-β3-α6-β4-β5，并插入在功能域1之中。此外，具體的結構也已經得到闡明，有文獻可供參考。(The?EMBOJournal?Vol?17?No16?pp4545-4558，1998)

S4是核糖體的重要組分，原核生物的S4可結合于16S?rRNA，從而影響翻譯的準確性、16S?rRNA的高級結構等等。(Nowotny?and?Nierhaus，1988；Allenand?Noller，1989)根據研究，在缺少其他蛋白的情況下，S4也能與16SrRNA相互作用。

S4也是一種RNA結合蛋白，與其他核糖體蛋白一樣，原核生物的S4核糖體蛋白可以結合于編碼自身的mRNA(α操縱子mRNA)結合從而調控自身的表達，由于α操縱子mRNA除編碼S4外，還編碼S11，S13和L17，所以S4可以通過結合于多聚順反子mRNA從而調控自身和其他一些核糖體蛋白的表達。(Dean?andNomura，1980；Thomas?et?al.，1987)(The?EMBO?Journal?Vol?17?No16pp4559-4571，1998)

S4與rRNA和mRNA的結合位點的氨基酸序列沒有特別的同源性，但這兩種RNA的結構相似性也未得到證明，此方面還有待進一步研究。

目前的實驗的結果還表明，S4在30S的裝配過程、保持翻譯的真實性中起作用。

綜上所述，S4核糖體蛋白的功能如下：(1)在原核生物中S4可以結合于16SrRNA，從而影響翻譯的準確性、16S?rRNA的高級結構等等，推測S4在真核生物細胞內也有同樣功能；(2)S4也可結合于編碼自身的mRNA，從而調控自身和其他一些核糖體蛋白的表達；(3)S4還可以促進核糖體的小亞基的裝配，在小亞基的裝配過程、保持翻譯的真實性中起作用；(4)S4還與真核生物轉錄因子的ETS功能域同源，因此被推測可以調控真核生物的轉錄過程。

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與人S4核糖體蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人S4核糖體蛋白13.97。