[發明專利]一種新的多肽——與染色體易位相關的熱點結合蛋白9.79和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00117053.8
• 申請日: 2000-07-07
• 公開（公告）號: CN1333220A
• 公開（公告）日: 2002-01-30
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——與染色體易位相關的熱點結合蛋白9.79，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

人類白血病及淋巴瘤等疾病中常發生染色體易位現象，易位是指染色體區段的交換，包括由兩近端點著絲粒染色體的著絲粒融合及相互易位。前者當產生配子時，產生染色體數目偏差，后者的攜帶者可形成具有不平衡的染色體組的配子。免疫球蛋白(Ig)/T細胞受體(TCR)重組酶以及其它靶序列在染色體重組中起重要作用，染色體1p32、8q24、18q21、14q11(TCR?Vδ3位點)和14q32(Ig?DH位點)的重組熱點區域具同一序列：ATGCAG和GCCC[A/T][G/C][G/C][A/T]。

1995年Katsunori?Aoki等人克隆出一新的基因——Translin基因，它由ReHF-1和BCLF-1基因組成。該基因由2.7kb組成，其終止密碼子(TAG)位于228位的Lys的下游、多聚腺苷酸(Poly?A)信號的上游。該基因中，GCAGA[A/T]C和CCCA[C/G]GAC替代了Ig/TCR重組酶的斷裂連接位點。該基因僅定位于具Ig、TCR重組位點的淋巴細胞核，可能在DNA修復、復制、重組中起重要作用。其表達產物與已知的類似蛋白不同，由228個氨基酸組成，分子量為26180Dal。它由兩條鏈組成，每條鏈都由一“亮氨酸拉鏈”組成，通過二硫鍵連接。它含有7個疏水氨基酸組成的重復序列(其中5個是Leu，一個是Val)，橫跨10個α-螺旋，每個螺旋的反面富含極性或非極性的氨基酸鏈，這些氨基酸鏈由“亮氨酸拉鏈”組成，但其上游并沒有“螺旋-環-螺旋”結構。該蛋白的亞結構是一環狀的八聚體，在進化過程中高度保守。重組熱點結合因子(ReHF-1)在染色體8q24和1p32的斷裂結合位點與信號序列特異性結合，另一類似于ReHF-1的蛋白—BCLF-1，特異性地和淋巴腫瘤患者攜帶的t(8；14)(p32；q11)易位中致癌基因Bc1-2的靶序列的成簇斷裂位點結合，重組熱點區域的結合活性在淋巴腫瘤的染色體易位中起重要作用。ReHF-1和BCLF-1蛋白具很高的同一性，相似的分子量(27KD)，并競爭同一靶序列，它們在人類淋巴惡性腫瘤中能識別各種染色體易位的相似的斷裂結合位點。[Nature?Genetics，1995，10：167-174]

染色體畸變會引起各種疾病，相互易位產生的配子在減數分裂后期分離時，會出現相互分離，配子可能會接受部分重復的染色體區段，根據受累染色體的區段不同，可產生不同的疾病類型。Translin蛋白在染色體易位方面有重要作用，若異常，會產生各種遺傳疾病，嚴重危害人類健康。此外，它在上述各種疾病的診斷、治療方面也有一定作用。

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與與染色體易位相關的熱點結合蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為與染色體易位相關的熱點結合蛋白9.79。

由于如上所述與染色體易位相關的熱點結合蛋白9.79蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的與染色體易位相關的熱點結合蛋白9.79蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新與染色體易位相關的熱點結合蛋白9.79蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——與染色體易位相關的熱點結合蛋白9.79以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼與染色體易位相關的熱點結合蛋白9.79的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼與染色體易位相關的熱點結合蛋白9.79的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產與染色體易位相關的熱點結合蛋白9.79的方法。