[發明專利]一種新的多肽——人核孔蛋白p54－16.61和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00117026.0
• 申請日: 2000-07-07
• 公開（公告）號: CN1333245A
• 公開（公告）日: 2002-01-30
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人核孔蛋白p54-16.61，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

在真核細胞中，核質之間存在著連續而有選擇性的雙向物質交換，核孔復合體(NPC)是一種特殊的跨膜運輸蛋白復合體，構成核質間雙向運輸的親水性通道，包括兩種運輸方式，被動擴散和主動運輸。核孔復合體主要由蛋白質組成，含有N-連接糖蛋白，起到穩定復合體結構的功能；還存在至少8-10種O-連接糖蛋白，構成了核孔蛋白家族(nucleoporin)，它們能夠與麥胚凝集素(WGA)強烈親合，它們背向核周隙，直接暴露于胞質和核質，可能這類糖蛋白即構成胞質和核質絲狀物，直接參與核質物質交換。根據免疫交叉反應的事實，表明從酵母到人核孔蛋白有很強的同源性，核孔復合體整個結構在進化上是高度保守的。四種哺乳動物O-連接蛋白，遷移率分別為62、58、54、45KD，構成了p62復合體(Finlay?et?al.，1991；Kita?et?al.，1993)。

從鼠肝NE中分離到了p62復合體(Guan?et?al.，1995)，分別得到了p62、p58、p54和p45四種蛋白。其中p54的開放閱讀框編碼約55KDa的蛋白，含有510個氨基酸殘基。p54蛋白含有多個FG二肽結構域(8FG)，與p58(14FG)和p62(6FG)相似。FG重復結構出現在低電荷氨基酸處，往往富含Gly、Ser、Thr殘基。p54的FG重復結構集中在其氨基末端區域(殘基5-88)，而p58的FG出現在氨基和羧基末端區域(殘基7-67和474-565)。這種FG重復區域可能與細胞質運輸因子發生相互作用(Paschal?and?Gerace，1995；Radu?et?al.，1995b；Iovine?et?al.，1995)，其具體功能還有待于進一步的研究。p54還含有多個PA二肽序列重復結構(Starr?et?al.，1990)，在p62、p58和p45中也分別出現。另外，p58和p54都含有兩個或更多的20-40氨基酸區段，趨向于形成α-螺旋的卷曲螺旋結構，p54潛在的卷曲螺旋結構出現在325-415殘基之間以及它的羧基末端FG重復區域。這些卷曲螺旋結構與p62復合體不同亞基之間同型或異型的相互作用有關，p62的一個195氨基酸的區域包含的卷曲螺旋區段就能夠結合p54(Buss?and?Stewart，1995)。

本發明的多肽與上述的核孔蛋白p54有95％的相同性，99％的相似性，并且包含核孔蛋白家族特征性的保守序列，因此認為此蛋白是一種新的核孔蛋白，具有與核孔蛋白p54相似的生物學功能，并命名為人核孔蛋白p54-16.61。

由于如上所述人核孔蛋白p54-16.61蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人核孔蛋白p54-16.61蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人核孔蛋白p54-16.61蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人核孔蛋白p54-16.61以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人核孔蛋白p54-16.61的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人核孔蛋白p54-16.61的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人核孔蛋白p54-16.61的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人核孔蛋白p54-16.61的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人核孔蛋白p54-16.61的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人核孔蛋白p54-16.61異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；