[發(fā)明專(zhuān)利]一種新的多肽——人轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白13.09和編碼這種多肽的多核苷酸

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00116952.1
• 申請(qǐng)日: 2000-06-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN1331225A
• 公開(kāi)（公告）日: 2002-01-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 上海博德基因開(kāi)發(fā)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07K14/435
• 分類(lèi)號(hào): C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，本發(fā)明描述了一種新的多肽——人轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白13.09，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

發(fā)部位浸入淋巴管，血管或體腔，被帶到他處而繼續(xù)生長(zhǎng)，形成與原發(fā)瘤同樣類(lèi)型的腫瘤。這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為轉(zhuǎn)移。良性腫瘤不轉(zhuǎn)移，只有惡性腫瘤才可能發(fā)生轉(zhuǎn)移。因此，研究與轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因?qū)α私廪D(zhuǎn)移發(fā)生的機(jī)制和治療腫瘤都有極大的意義。

在從人乳腺癌細(xì)胞來(lái)源的細(xì)胞系中，分析其轉(zhuǎn)移特性時(shí)分離得到了一個(gè)在轉(zhuǎn)移與不轉(zhuǎn)移的細(xì)胞中有差異表達(dá)的蛋白：轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白(Down-Regulated?InMetastasis，DRIM)。這一蛋白包含有2785個(gè)氨基酸殘基，在酵母和線蟲(chóng)中都找到了其同源的蛋白。并且DRIM含保守的帶正電的尾巴和幾個(gè)HEAT重復(fù)序列。在幾種正常組織和幾種癌細(xì)胞系中都發(fā)現(xiàn)了DRIM的表達(dá)。【Anticancer?Res?1998May-Jun；18(3A)：1409-21】

通過(guò)基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細(xì)胞株、LPS+的Ecv304細(xì)胞株胸腺、正常成纖維細(xì)胞1024NC、Fibroblast，生長(zhǎng)因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長(zhǎng)因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長(zhǎng)因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細(xì)胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細(xì)胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門(mén)癌中，本發(fā)明的多肽的表達(dá)譜與人轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白的表達(dá)譜非常近似，因此二者功能也可能類(lèi)似。本發(fā)明被命名為人轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白13.09。由于如上所述人轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白13.09蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過(guò)程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過(guò)程的人轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白13.09蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白13.09蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開(kāi)發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽——人轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白13.09以及其片段、類(lèi)似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼人轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白13.09的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼人轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白13.09的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供生產(chǎn)人轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白13.09的方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供針對(duì)本發(fā)明的多肽——人轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白13.09的抗體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了針對(duì)本發(fā)明多肽——人轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白13.09的模擬化合物、拮抗劑、激動(dòng)劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供診斷治療與人轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白13.09異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中2312-2671位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-3580位的序列。

本發(fā)明另外涉及一種含有本發(fā)明多核苷酸的載體，特別是表達(dá)載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細(xì)胞，包括轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)染的宿主細(xì)胞；一種包括培養(yǎng)所述宿主細(xì)胞和回收表達(dá)產(chǎn)物的制備本發(fā)明多肽的方法。

本發(fā)明還涉及一種能與本發(fā)明多肽特異性結(jié)合的抗體。

本發(fā)明還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制人轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白13.09蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本發(fā)明的多肽。本發(fā)明還涉及用該方法獲得的化合物。

本發(fā)明還涉及一種體外檢測(cè)與人轉(zhuǎn)移下調(diào)蛋白13.09蛋白異常表達(dá)相關(guān)的疾病或疾病易感性的方法，包括檢測(cè)生物樣品中所述多肽或其編碼多核苷酸序列中的突變，或者檢測(cè)生物樣品中本發(fā)明多肽的量或生物活性。

本發(fā)明也涉及一種藥物組合物，它含有本發(fā)明多肽或其模擬物、激活劑、拮抗劑或抑制劑以及藥學(xué)上可接受的載體。