[發(fā)明專利]一種新的多肽——人p70核糖體S6激酶11.77和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00116899.1
• 申請日: 2000-06-30
• 公開（公告）號: CN1331313A
• 公開（公告）日: 2002-01-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C12N15/54
• 分類號: C12N15/54;C12N9/12;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/48;C12Q1/68;A61K38/45
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——人p70核糖體S6激酶11.77，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

原與細(xì)胞表面受體結(jié)合，以調(diào)控生物體內(nèi)相應(yīng)的細(xì)胞分裂過程的進(jìn)行。細(xì)胞分裂過程最早表現(xiàn)為蛋白的合成，蛋白合成是細(xì)胞增殖的開始。而蛋白的合成又受到生物體內(nèi)多種蛋白的調(diào)控，許多蛋白通過其特殊位點的磷酸化來促進(jìn)蛋白的定位與轉(zhuǎn)運。核糖體S6蛋白的磷酸化即是其中的一種，在生物體內(nèi)核糖體蛋白S6在體內(nèi)胰島素、表皮生長因子、胚胎衍生生長因子及其它多種蛋白的刺激下由核糖體S6激酶完成其磷酸化過程，以促進(jìn)體內(nèi)相關(guān)細(xì)胞增殖及分裂過程的完成。該核糖體蛋白的磷酸化是體內(nèi)信號傳導(dǎo)的一種重要方式。

1991年，Grove等人從人中克隆得到了一新的p70核糖體S6激酶，并對該蛋白的結(jié)構(gòu)及功能進(jìn)行了研究。該蛋白在生物體內(nèi)具有蛋白絲氨酸激酶的作用活性，在生物體內(nèi)催化核糖體S6的磷酸化過程。研究發(fā)現(xiàn)，所有的核糖體S6激酶均具有相似的底物特異性，該蛋白激酶家族成員的氨基酸序列中均含有保守的催化結(jié)構(gòu)區(qū)域及非催化結(jié)構(gòu)區(qū)域。其中催化結(jié)構(gòu)區(qū)域是蛋白與核糖體S6結(jié)合并促進(jìn)其磷酸化的重要活性中心。該蛋白激酶的突變或表達(dá)異常將直接影響體內(nèi)相關(guān)蛋白及細(xì)胞增殖的異常，進(jìn)而影響細(xì)胞的分化及生長[J.Russell?Grove，PapiaBanerjee?et?al.，1991，Molecular?and?Cellular?Bio1ogy，11(11)：5541-5550]。

由上可知，p70核糖體S6激酶在生物體細(xì)胞增殖及生長過程中起著極為重要的作用，其在生物體內(nèi)通過催化相關(guān)核糖體S6蛋白的磷酸化，以調(diào)控體內(nèi)相關(guān)細(xì)胞的增殖及分裂。該蛋白的突變或表達(dá)異常將直接影響相關(guān)細(xì)胞的正常分裂及生長，進(jìn)而引發(fā)各種相關(guān)的疾病。該蛋白在體內(nèi)通常與多種組織的生長異常、相關(guān)的組織的腫瘤及癌癥等的發(fā)生密切相關(guān)。其還可用于診斷及治療上述各種相關(guān)的疾病。

通過基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細(xì)胞株、LPS+的Ecv304細(xì)胞株胸腺、正常成纖維細(xì)胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細(xì)胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細(xì)胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發(fā)明的多肽的表達(dá)譜與人p70核糖體S6激酶的表達(dá)譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為人p70核糖體S6激酶11.77。

由于如上所述人p70核糖體S6激酶11.77蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人p70核糖體S6激酶11.77蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人p70核糖體S6激酶11.77蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽——人p70核糖體S6激酶11.77以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼人p70核糖體S6激酶11.77的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼人p70核糖體S6激酶11.77的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產(chǎn)人p70核糖體S6激酶11.77的方法。本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽——人p70核糖體S6激酶11.77的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽——人p70核糖體S6激酶11.77的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與人p70核糖體S6激酶11.77異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；