[發明專利]一種新的多肽——人Miller－Dieker無腦回蛋白(LIS1)9.9和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00116843.6
• 申請日: 2000-06-28
• 公開（公告）號: CN1331172A
• 公開（公告）日: 2002-01-16
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人Miller-Dieker無腦回蛋白(LIS1)9.9，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

種由一個平滑的大腦表面以及異常的神經元遷移表現出的人類的腦畸形。確定參與這種疾病的基因將會利于進行分子解剖腦發育中的正常事件。I型無腦會既可作為一種獨立的腦畸形發生，也可與畸形面部表象發生于患Miller-Dieker綜合癥的病人中。約有15％患有獨立無腦回病的患者以及超過90％的患有Miller-Dieker綜合征的病人在染色體17p13.3的一個關鍵性350-kb區域具有微缺失。這些缺失是半合子的，，因而說明在這個間隔中一個基因的單倍機能不全。

近來發現一種新基因(LIS-1，無腦回-1)，位于染色體17p13.3中，在Miller-Dieker患者中缺失，它被確定是Miller-Dieker無腦回疾病基因，該蛋白降解的氨基酸序列與異源三聚體G蛋白的beta亞基有顯著的同源性，這說明它參與一種對于大腦發育至為關鍵的信號傳導途徑。該基因發生缺失或突變導致Miller-Dieker無腦回蛋白(LIS1)表達異常，致使大腦發育至為關鍵的信號傳導途徑異常，從而引發Miller-Dieker無腦回疾病(Reiner，O.，Carrozzo，R.，Shen，Y.，Wehnert，M.，Faustinella，F.，Dobyns，W.B.，Caskey，C.T.andLedbetter，D.H.，Nature364(6439)，717-721(1993))。

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與人Miller-Dieker無腦回蛋白(LIS1)的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人Miller-Dieker無腦回蛋白(LIS1)9.9。

由于如上所述人Miller-Dieker無腦回蛋白(LIS1)9.9蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人Miller-Dieker無腦回蛋白(LIS1)9.9蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人Miller-Dieker無腦回蛋白(LIS1)9.9蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人Miller-Dieker無腦回蛋白(LIS1)9.9以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人Miller-Dieker無腦回蛋白(LIS1)9.9的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人Miller-Dieker無腦回蛋白(LIS1)9.9的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人Miller-Dieker無腦回蛋白(LIS1)9.9的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人Miller-Dieker無腦回蛋白(LIS1)9.9的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人Miller-Dieker無腦回蛋白(LIS1)9.9的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人Miller-Dieker無腦回蛋白(LIS1)9.9異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。