[發明專利]一種新的多肽——人熱激蛋白2(apg2)9.9和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00116840.1
• 申請日: 2000-06-28
• 公開（公告）號: CN1331171A
• 公開（公告）日: 2002-01-16
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人熱激蛋白2(apg2)9.9，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

度增加的壓力時，都會合成一系列防御型蛋白以維持胞內環境穩定。這些蛋白被認為是熱激或壓力-誘導蛋白，它們的合成在許多水平被調節，包括轉錄，RNA作用，以及翻譯。熱激基因的轉錄在溫度壓力后被迅速誘導；該反應由一個啟動子元件，熱激因子(HSE)介導，HSE由三個插入重復序列NGAAN構成。HSE與一個多聚體轉錄刺激蛋白結合，后者被稱為熱激因子(HSE)(Clos，J.，Westwood，J.T.，Becker，P.B.，Wilson，S.，Lambert，K.&Wu，C.(1990)Cell63，1085-1097)。

熱激反應由多種不同的壓力誘導生成，包括溫度壓力，酒精，重金屬，以及氧張力。熱激反應由一種在進化上保守的蛋白轉錄調控，即熱激蛋白2(apg2)。該蛋白有一高度保守的區域具有重要的功能，能夠形成一個酸性的兩親性螺旋，其中含有一個亮氨酸重復，該C-端區域作為一個轉錄活性域起作用。由apg2基因編碼的蛋白允許人體細胞響應不同的壓力引發因素，并幫助調節響應不太嚴重的壓力形式。在完整的生物體中，不同類型的細胞以不同的方式響應壓力，而apg?2只在特定類型的細胞中對不同的壓力引發因素起作用(Thomas?J.Schretz，Gregory?J.Gallo，Lynn?Sheldon，Paul?Tempst，and?Robert?E.Kingston，Pro.Natl.Acad.Sci.USA(1991)88，6911-6915)。

通過監測受壓細胞核中apg-2的積累，或通過監測apg-2的多聚狀態可診斷處于異常壓力狀況下的細胞與疾病。此外，apg-2及其激動劑，抑制劑，拮抗劑還可用于診斷兼防止與熱激反應相關的疾病與緊張。

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與人熱激蛋白2(apg2)的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人熱激蛋白2(apg2)9.9。

由于如上所述人熱激蛋白2(apg2)9.9蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人熱激蛋白2(apg2)9.9蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人熱激蛋白2(apg2)9.9蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人熱激蛋白2(apg2)9.9以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。本發明的另一個目的是提供含有編碼人熱激蛋白2(apg2)9.9的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人熱激蛋白2(apg2)9.9的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人熱激蛋白2(apg2)9.9的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人熱激蛋白2(apg2)9.9的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人熱激蛋白2(apg2)9.9的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人熱激蛋白2(apg2)9.9異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。