[發(fā)明專利]一種新的人核糖體亞基蛋白及其編碼序列

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00116786.3
• 申請(qǐng)日: 2000-06-27
• 公開（公告）號(hào): CN1281039A
• 公開（公告）日: 2001-01-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許相儒;錢斌治;楊義生;顧彥杰;陳竺;韓澤廣
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 國(guó)家人類基因組南方研究中心
• 主分類號(hào): C12N15/10
• 分類號(hào): C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C07K14/435;C07K16/18;C07H21/00;C12Q1/68
• 代理公司: 復(fù)旦大學(xué)專利事務(wù)所
• 代理人: 陸飛

本發(fā)明涉及分子生物學(xué)、酶學(xué)、病理學(xué)以及基因工程等領(lǐng)域。具體地，本發(fā)明涉及一種在人類樹突狀細(xì)胞中表達(dá)的h15sRP蛋白及其核酸序列。本發(fā)明還涉及該蛋白和核酸序列的制備方法和用途。

核糖體是生物合成蛋白質(zhì)的場(chǎng)所，由大小兩個(gè)亞基組成。真核生物的核糖體亞基分別為60s與40s(s為高速離心時(shí)大分子物質(zhì)的沉降系數(shù)單位，在一定程度上反映大分子的分子量和形狀，常用來(lái)表示大分子物質(zhì)的大小)；而原核生物的分別為50s與30s。核糖體亞基由幾種rRNA以及若干種核糖體亞基蛋白(ribosomal?subunitprotein，RP)組成，各種核糖體亞基蛋白在蛋白質(zhì)生物合成的過(guò)程中起著各自的作用。

本發(fā)明中，我們?cè)谌祟悩渫粻罴?xì)胞中克隆到Thermotoga?maritima核糖體30s亞基的組成部分15sRP基因的同源基因h15sRP。

在本發(fā)明被公布之前，尚未有任何公開或報(bào)道過(guò)本專利申請(qǐng)中提及的人類h15sRP蛋白序列及其核酸序列。本發(fā)明的第一目的就是提供一種新的人基因h15sRP(Genbank?Accession?No．AF265439)，該基因是一個(gè)人h15sRP蛋白基因。

本發(fā)明的第二目的是提供一種新的人蛋白h15sRP。

本發(fā)明的第三目的是提供一種利用重組技術(shù)生產(chǎn)上述的新的人h15sRP蛋白和核酸序列的方法。

本發(fā)明還提供了這種人h15sRP蛋白多肽和編碼序列的應(yīng)用。

在本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了一種分離出的DNA分子，該分子包括：編碼具有人h15sRP蛋白質(zhì)活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列與SEQ?ID?NO．6中從核苷酸第4-855位DNA分子的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度嚴(yán)緊條件下與SEQ?ID?NO．6中從核苷酸第4-855位的核苷酸序列雜交。較佳地，所述的序列編碼具有SEQ?ID?NO．7所示的氨基酸序列的多肽。更佳地，所述的序列具有SEQ?ID?NO．6中從核苷酸第4-855位的核苷酸序列。

在本發(fā)明的另一方面，提供了一種分離出的人h15sRP蛋白質(zhì)多肽，它包括：具有SEQ?ID?NO．7氨基酸序列的多肽、或其保守性變異多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO．7序列的多肽。

在本發(fā)明的另一方面，還提供了一種載體，它包含上述的DNA分子。

在本發(fā)明的另一方面，還提供了一種用上述載體轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞。在一個(gè)實(shí)例中該宿主細(xì)胞是大腸桿菌；在另一實(shí)例中，該宿主細(xì)胞是真核細(xì)胞。

在本發(fā)明的另一方面，還提供了一種產(chǎn)生具有人h15sRP蛋白質(zhì)活性的多肽的方法，其步驟如下：

(1)將編碼具有人h15sRP蛋白活性的多肽的核苷酸序列可操作地連于表達(dá)調(diào)控序列，形成人h15sRP蛋白表達(dá)載體，所述的核苷酸序列與SEQ?ID?NO．6中從核苷酸第4-855位的核苷酸序列有至少70％的同源性；

(2)將步驟(1)中的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞，形成人h15sRP蛋白的重組細(xì)胞；

(3)在適合表達(dá)人h15sRP蛋白多肽的條件下，培養(yǎng)步驟(2)中的重組細(xì)胞；

(4)分離出具有人h15sRP蛋白活性的多肽。

較佳地，在該方法中使用的核酸序列具有SEQ?ID?NO．6中第4-855位的序列。

本發(fā)明還提供了與h15sRP蛋白多肽特異性結(jié)合的抗體。

在本發(fā)明中，“分離的”、“純化的”或“基本純的”DNA是指，該DNA或片段已從天然狀態(tài)下位于其兩側(cè)的序列中分離出來(lái)，還指該DNA或片段已經(jīng)與天然狀態(tài)下伴隨核酸的組份分開，而且已經(jīng)與在細(xì)胞中伴隨其的蛋白質(zhì)分開。

在本發(fā)明中，術(shù)語(yǔ)“人h15sRP蛋白(或多肽)編碼序列”指編碼具有人h15sRP蛋白活性的多肽的核苷酸序列，如SEQ?ID?NO．6中第4-855位核苷酸序列及其簡(jiǎn)并序列。該簡(jiǎn)并序列是指，位于SEQ?ID?NO．6序列的編碼框第4-855位核苷酸中，有一個(gè)或多個(gè)密碼子被編碼相同氨基酸的簡(jiǎn)并密碼子所取代后而產(chǎn)生的序列。由于密碼子的簡(jiǎn)并性，所以與SEQ?ID?NO．6中第4-855位核苷酸序列同源性低至約70％的簡(jiǎn)并序列也能編碼出SEQ?ID?NO．7所述的序列。該術(shù)語(yǔ)還包括能在中度嚴(yán)緊條件下，更佳的在高度嚴(yán)緊條件下與SEQ?ID?NO．6中從核苷酸第4-855位的核苷酸序列雜交的核苷酸序列。該術(shù)語(yǔ)還包括與SEQ?ID?NO．6中從核苷酸第4-855位的核苷酸序列的同源性至少70％，較佳地至少80％，更佳地至少90％，最佳地至少95％的核苷酸序列。