[發明專利]一種新的多肽——人成視網膜細胞瘤結合蛋白(RBBP9)25.52和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00116751.0
• 申請日: 2000-06-26
• 公開（公告）號: CN1331140A
• 公開（公告）日: 2002-01-16
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人成視網膜細胞瘤結合蛋白(RBBP9)25.52，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

發生于一側或雙側眼睛未分化視網膜中的腫瘤。在這一年齡組，它是一種最高發的眼部腫瘤，發病率為1/12000。正常的成視網膜細胞瘤基因具有結合DNA的功能，可控制著細胞周期G1向S期的轉換。該基因兩個等位基因功能的喪失可引起腫瘤。遺傳型和非遺傳型的成視網膜細胞瘤是由腫瘤抑制基因RB-1的突變引起的(Lee，W.-H.et?al.Human?retinobla?stoma?susceptibility?gene：cloning，identifi?cation?and?sequence.Science?235，1394-1399(1987))。

成視網膜細胞瘤(RB)基因是一種腫瘤抑制基因。RB等位基因都發生缺失或是失活是攜帶突變的RB基因家族形成成視網膜細胞瘤以及骨肉瘤的關鍵性限速步驟。在其他人類腫瘤中也發現存在有失活的RB基因。RB功能的損傷與控制細胞增殖的損傷相關，介入野生型的RB能夠抑制細胞增長與腫瘤發生能力。因而，確定參與或控制RB蛋白功能的因子對于了解細胞周期以及腫瘤發生都是至關重要的。近來發現了一種新的基因：RBBP9，它編碼人成視網膜細胞瘤結合蛋白，在人類主要的肝癌中過量表達，對TGF-betal的生長抑制效應產生拮抗。RBBP9蛋白與其他成視網膜細胞瘤結合蛋白具有同源性，并含有Rb-結合的特征序列模板：LXCXE，還具有兩個酪蛋白激酶II磷酸化位點。RBBP9/Rb復合物中不含有E2F-1，當RBBP9持續地過量表達，細胞將被迅速轉化并形成肝癌樣腫瘤。RBBP9通過與Rb作用對TGF-betal的生長抑制效應產生拮抗表明它在轉化過程中是極為重要的(Joseph?T.Woitach，Minghuang?Zhang，Chien-Hua?Niu?&?SnorriS.Thoreirsson，Nature?Genetics?19，371-374(1998))。

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv?304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與人成視網膜細胞瘤結合蛋白(RBBP9)的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人成視網膜細胞瘤結合蛋白(RBBP9)25.52。

由于如上所述人成視網膜細胞瘤結合蛋白(RBBP9)25.52蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人成視網膜細胞瘤結合蛋白(RBBP9)25.52蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人成視網膜細胞瘤結合蛋白(RBBP9)25.52蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人成視網膜細胞瘤結合蛋白(RBBP9)25.52以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人成視網膜細胞瘤結合蛋白(RBBP9)25.52的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人成視網膜細胞瘤結合蛋白(RBBP9)25.52的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人成視網膜細胞瘤結合蛋白(RBBP9)25.52的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人成視網膜細胞瘤結合蛋白(RBBP9)25.52的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人成視網膜細胞瘤結合蛋白(RBBP9)25.52的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人成視網膜細胞瘤結合蛋白(RBBP9)25.52異常相關的疾病的方法。