[發明專利]一種新的多肽——鈉/鉀腺苷三磷酸酶beta－2亞基(atpb2)9.57和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00116742.1
• 申請日: 2000-06-26
• 公開（公告）號: CN1331328A
• 公開（公告）日: 2002-01-16
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C12N15/55
• 分類號: C12N15/55;C12N9/18;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/42;C12Q1/68;A61K38/46
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——鈉/鉀腺苷三磷酸酶beta-2亞基(atpb2)9.57，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

于所有動物細胞的質膜中(Horisberger?J.D.，Lemas?V.，Krahenbul?J.P.，Rossier?B.C.，Annu.Rev.Physio1.53：565-584(1991))，是一種催化亞基(alpha鏈)，一種約為34Kd(beta鏈)的糖蛋白亞基以及一種約為6Kd小的疏水蛋白的異源三聚體，它是主要的離子動勢腺苷三磷酸酶，它伴隨腺苷三磷酸分子中所含的自由能轉運Na⁺及K⁺穿過胞質膜。Na⁺，K⁺腺苷三磷酸酶中含有兩種亞基：alpha催化亞基以及beta亞基。

Na⁺，K⁺腺苷三磷酸酶中的beta亞基是具有組織特異性的糖蛋白，它通過組裝alpha/beta異源二聚體，調控轉運至質膜的鈉泵數量(McDonough?A.A.，Gerring?K.，Farley?R.A.，FASEB?J.4：1598-1605(1990))。Beta亞基在結構上由約35各殘基的帶電荷胞質域構成，后接一個跨膜域，與一個含有三個二硫鍵及糖基化位點的大的胞外域。現已知beta亞基的三種同種型：beta-1，beta-2及beta-3，它們具有50％的序列同一性，但不同的成員各有獨特的功能，例如beta-2亞基在中樞神經系統中表達，而beta-1亞基卻不在其中表達，此外beta-2亞基存在于脾臟，胸腺以及肺組織膜中，beta-1亞基也不存在于其中。胃(K⁺，H⁺)腺苷三磷酸酶(質子泵)與胃酸產生有關，它由兩個亞基構成，其beta鏈與鈉泵beta亞基高度同源。Beta亞基由兩個保守的特征序列模板：[FYW]-x(2)-[FYW]-x-[FYW]-[DN]-x(6)-[LIVM]-G-R-T-x(3)-W，位于胞質域，而第二個位于胞外域并含有參與形成二硫鍵的兩個半胱氨酸：[RK]-x(2)-C-[RKQWI]-x(5)-L-x(2)-C-[SA]-G。beta亞基還具有陽離子轉運能力以及烏本(箭毒)苷結合能力。

在許多可興奮細胞中，鈉通道是負責由最初動作電位去極化而增加初始的鈉通透性，這些可興奮細胞包括肌肉，神經，以及心臟細胞。心臟鈉通道尤其與刺激與傳導心肌細胞中的動作電位有關(Fozzard，H.A.，et?al.，Circ.Res.，56：475-485(1985))。Na⁺，K⁺腺苷三磷酸酶廣泛存在于所有的細胞中確保了對細胞容積的重要控制并維持了通過細胞膜的Na⁺，K⁺梯度。鈉/鉀腺苷三磷酸酶beta-2亞基(atpb2)在上皮細胞基底外側膜的不對稱分布使得鹽和水可自細胞層一側向量轉運(正如在腎及腸中所進行的)，從而控制胞外容積以及胞內胞外區室間的滲透平衡。在可興奮細胞中，鈉/鉀腺苷三磷酸酶beta-2亞基(atpb2)對于控制膜電位是至關重要的，因而與組織的可興奮性密切相關。該多肽及其抑制劑，激動劑，拮抗劑可用與診斷，防治自身免疫性胃炎等疾病，還可作為抗心律不齊藥物以及強心劑。

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與鈉/鉀腺苷三磷酸酶beta-2亞基(atpb2)的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為鈉/鉀腺苷三磷酸酶beta-2亞基(atpb2)9.57。