[發明專利]一種新的多肽——人成束和延伸蛋白13.2和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00116636.0
• 申請日: 2000-06-21
• 公開（公告）號: CN1329071A
• 公開（公告）日: 2002-01-02
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人成束和延伸蛋白13.2，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

經系統中，軸突往往要穿過不同的細胞外環境才能到達目的地。大多數軸突沿著其他的軸突生長，而將不同的軸突集中在神經束中，很可能在神經系統的組織中起重要的作用。通過對線蟲運動障礙的突變株的分析發現了一組基因，當它們發生突變時會影響神經纖維束中的軸突的生長，但是在周圍無神經纖維的基質中的軸突則不受影響。具體的說，這組蛋白(unc-34，unc-71，unc76)的突變會導致兩種缺陷：許多背/腹神經索神經纖維束中的軸突不能夠伸長到正常的長度；另外，許多軸突也不能保持在正常情況下應該存在的神經纖維束中。unc-76可能的兩個功能是：其一，unc-76蛋白可能通過與細胞表面黏附蛋白，軸突膜，細胞骨架等的相互作用在神經纖維束的形成和/或維持中起重要作用；其二，unc-76蛋白可能將信號從細胞表面傳遞到細胞內部來調節軸突的延伸和黏附。【Proc.Natl.Acad.Sci.USA?Vol.94，pp.3414-3419，April1997】人類的unc-76人FEZ1蛋白稱為FEZ1(成束和延伸蛋白ξ-1)。它由393個氨基酸殘基構成，精氨酸/谷氨酸含量高，其N端是高度酸化的，有些部位含有兩性螺旋。FEZ1沒有信號序列，也沒有跨膜區域，這一性質暗示它是存在于細胞內部的。FEZ1在成年鼠腦和鼠胚胎中的表達都表達較高。FEZ1可以與PKCZξ亞基的N端可變區域相互作用，還可以同PKCσ發生弱的相互作用。這說明FEZ1是PKC的底物之一。FEZ1在哺乳動物中通過PKCξ相互作用發揮其軸突導向的關鍵作用。【Proc?Natl?Acad?Sci?USA?1999?Mar?30；96(7)：3928-33】

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與人FEZ1蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人成束和延伸蛋白13.2。

由于如上所述人成束和延伸蛋白13.2蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人成束和延伸蛋白13.2蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人成束和延伸蛋白13.2蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人成束和延伸蛋白13.2以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人成束和延伸蛋白13.2的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人成束和延伸蛋白13.2的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人成束和延伸蛋白13.2的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人成束和延伸蛋白13.2的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人成束和延伸蛋白13.2的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人成束和延伸蛋白13.2異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中135-497位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-2200位的序列。