[發(fā)明專(zhuān)利]一種新的多肽——RNA聚合酶II相關(guān)蛋白11.33和編碼這種多肽的多核苷酸

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00116633.6
• 申請(qǐng)日: 2000-06-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN1329142A
• 公開(kāi)（公告）日: 2002-01-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 上海博德基因開(kāi)發(fā)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/52
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/52;C12N9/00;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/25;C12Q1/68;A61K38/43
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，本發(fā)明描述了一種新的多肽——RNA聚合酶II相關(guān)蛋白11.33，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

的蛋白因子統(tǒng)稱(chēng)為“轉(zhuǎn)錄因子”。這些反式作用的蛋白因子有兩大類(lèi)，一類(lèi)是結(jié)合于啟動(dòng)子核心序列如TATA框及其附近的因子，稱(chēng)為轉(zhuǎn)錄因子或普遍性轉(zhuǎn)錄因子，如TFIIA、TFIIB、TFIID、TFIIE等，另一類(lèi)為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子。RNA聚合酶的亞基是轉(zhuǎn)錄某個(gè)階段或整個(gè)過(guò)程都需要的，但它們往往不是對(duì)個(gè)別的啟動(dòng)子特異性的。

轉(zhuǎn)錄因子IIF(TFIIF)是在轉(zhuǎn)錄周期中起始與延伸階段RNA聚合酶II的別構(gòu)劑，在起始階段轉(zhuǎn)錄因子IIF圍繞著RNA聚合酶II誘導(dǎo)DNA啟動(dòng)子在復(fù)合體上卷曲為幾乎一個(gè)反轉(zhuǎn)，這一復(fù)合體包含普遍性的轉(zhuǎn)錄因子TATA結(jié)合蛋白、TFIIB和TFIIE。研究顯示，在延伸階段，轉(zhuǎn)錄因子IIF也支持RNA聚合酶II更加活躍的構(gòu)象。

轉(zhuǎn)錄因子IIF的RNA聚合酶II相關(guān)蛋白74亞基上的一個(gè)特定區(qū)域，對(duì)于前起始復(fù)合物異構(gòu)化作用是必需的，對(duì)于延伸的繼續(xù)也是必需的。這一區(qū)域的氨基酸置換顯示，它具有轉(zhuǎn)錄起始與延伸相似的作用。氨基酸突變顯示這一區(qū)域上的L155，W164，N172，I176，and?M177氨基酸殘基對(duì)于轉(zhuǎn)錄是非常重要的。轉(zhuǎn)錄因子IIF也顯示了對(duì)于快速延伸的RNA聚合酶II比之于停滯的RNA聚合酶II有更高的高親和性。RNA聚合酶II相關(guān)蛋白74功能區(qū)域上I176位氨基酸殘基的置換會(huì)降低RNA聚合酶II相關(guān)蛋白74對(duì)于轉(zhuǎn)錄因子IIF的親和性。(Mol?Cell?Biol1999?Dec；19(12)：8372-82)

研究發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)錄因子IIF的RNA聚合酶II相關(guān)蛋白74的磷酸化作用與病毒HIV-I長(zhǎng)末端的重復(fù)序列的Tat活性轉(zhuǎn)錄是密切相關(guān)的。(Virology?2000?Mar15；268(2)：452-60)

通過(guò)基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細(xì)胞株、LPS+的Ecv304細(xì)胞株胸腺、正常成纖維細(xì)胞1024NC、Fibroblast，生長(zhǎng)因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長(zhǎng)因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長(zhǎng)因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細(xì)胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細(xì)胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門(mén)癌中，本發(fā)明的多肽的表達(dá)譜與RNA聚合酶II相關(guān)蛋白74的表達(dá)譜非常近似，因此二者功能也可能類(lèi)似。本發(fā)明被命名為RNA聚合酶II相關(guān)蛋白11.33。

由于如上所述RNA聚合酶II相關(guān)蛋白11.33蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過(guò)程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過(guò)程的RNA聚合酶II相關(guān)蛋白11.33蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新RNA聚合酶II相關(guān)蛋白11.33蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開(kāi)發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽——RNA聚合酶II相關(guān)蛋白11.33以及其片段、類(lèi)似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼RNA聚合酶II相關(guān)蛋白11.33的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼RNA聚合酶II相關(guān)蛋白11.33的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供生產(chǎn)RNA聚合酶II相關(guān)蛋白11.33的方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供針對(duì)本發(fā)明的多肽——RNA聚合酶II相關(guān)蛋白11.33的抗體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了針對(duì)本發(fā)明多肽——RNA聚合酶II相關(guān)蛋白11.33的模擬化合物、拮抗劑、激動(dòng)劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供診斷治療與RNA聚合酶II相關(guān)蛋白11.33異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；