[發(fā)明專利]一種新的多肽——鼠瞬時性感受器電位蛋白2(Trp2)12和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00116592.5
• 申請日: 2000-06-19
• 公開（公告）號: CN1329011A
• 公開（公告）日: 2002-01-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/00;C07K16/18;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——鼠瞬時性感受器電位蛋白2(Trp2)12，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

獲能Ca²⁺入口(CCE)是Ca²⁺在刺激肌醇1，4，5-三磷酸(IP3)形成以及起始Ca²⁺儲存減少后進入。CCE通道是在磷脂酶C-beta刺激后被一種G蛋白-伴隨受體以及一系列通過促進減少內(nèi)部儲存的操作激活的Ca²⁺-通透性陽離子通道，這些操作包括激活磷脂酶C-gamma，抑制與注入Ca²⁺儲存起來有關(guān)的Ca²⁺-/ATP酶并維持剩余的胞質(zhì)Ca²⁺，或通過僅只導入足夠高濃度的Ca²⁺螯合物以確保一定量的Ca²⁺螯合物從內(nèi)部儲存中溢出。CCE的一個特點是它還能夠僅由儲存的減少來激發(fā)，正如在用毒胡蘿卜內(nèi)酯抑制內(nèi)部Ca²⁺泵后所發(fā)生的一樣。瞬時性感受器電位(Trp)蛋白作為一類由刺激IP3形成的拮抗劑激活的可通透陽離子通道的結(jié)構(gòu)亞基起作用，與通過IP3受體與Ca²⁺入口通道的一個Trp亞基間的一種直接作用非常相似。Trp在Ca²⁺入口中的作用僅由儲存減少來激發(fā)(Sus?s，E.，Bara?sh，S.，Stavenga，D.G.，Stieve，H.，Selinger，Z.&Minke，B.(1989)J.Gen.Physiol.94，465-491)。

鼠的trp2的cDNA與人的trp2假基因同源。鼠的Trp2不僅在使用一種拮抗劑刺激之后被激活，而且在不用拮抗劑時通過儲存減少一樣可被激活。與其它Trp蛋白相比，Trp2-介導的Ca²⁺入口由儲存減少的激活，可在揭示內(nèi)源性儲存減少-激活的Ca²⁺入口的相同狀況下觀察到，這些都表明Trp蛋白是儲存-Ca²⁺以及受體-操作的Ca²⁺通道亞基。綜上所述，Trp2在細胞中的表達將導致由拮抗劑以及Ca²⁺儲存減少刺激CCE的增強。Trp2通過其本身或通過形成多聚體復合物(多數(shù)是四聚體)而形成Ca²⁺-通透的陽離子通道，這些通道在調(diào)節(jié)細胞代謝以及對胞外信號的反應(yīng)中起作用(Zhu，x.，Jiang，M.，Peyton，M.J.，Boulay，G.，Hurst，R.，Stefani，E.&Birnbaumer，L.(1996)Cell85，661-671)。

本發(fā)明新的多肽與鼠的瞬時性感受器電位蛋白2(Trp2)在蛋白水平上有81％的同一性和83％的相似性，且亦含有瞬時性感受器電位蛋白家族其他成員所共有的各種特征性序列片段，兩者均為瞬時性感受器電位蛋白家族的成員，且具有相似的生物學功能，命名為鼠瞬時性感受器電位蛋白2(Trp2)129。該蛋白在生物體內(nèi)的調(diào)節(jié)細胞代謝以及對胞外信號的反應(yīng)中起作用，其表達異常將引起一系列與Ca²⁺-通透的陽離子通道相關(guān)的細胞代謝疾病(Vannier，B.，Peyton，M.，Boulay，G.，Brown，D.，Qin，N.，Jiang，M.，Zhu，X.and?Birnbaumer，L.，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.96(5)，2060-2064(1999))。

由于如上所述鼠瞬時性感受器電位蛋白2(Trp2)12蛋白在調(diào)節(jié)細胞分裂和胚胎發(fā)育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的鼠瞬時性感受器電位蛋白2(Trp2)12蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新鼠瞬時性感受器電位蛋白2(Trp2)12蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽——鼠瞬時性感受器電位蛋白2(Trp2)12以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼鼠瞬時性感受器電位蛋白2(Trp2)12的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼鼠瞬時性感受器電位蛋白2(Trp2)12的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。