[發(fā)明專(zhuān)利]一種新的多肽——人β－葡萄糖苷酸酶11.88和編碼這種多肽的多核苷酸

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00116490.2
• 申請(qǐng)日: 2000-06-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN1328150A
• 公開(kāi)（公告）日: 2001-12-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 上海博德基因開(kāi)發(fā)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/56
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/56;C12N9/24;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/34;C12Q1/68;A61K38/47
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，本發(fā)明描述了一種新的多肽——人β-葡萄糖苷酸酶11.88，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

葡萄糖苷酸水解成乙醇和葡糖醛酸的反應(yīng)：

葡萄糖苷酸酶是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的一種結(jié)構(gòu)蛋白，當(dāng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)生變化時(shí)，葡萄糖苷酸酶在溶酶體中也會(huì)出現(xiàn)。【Nature，213，457，1967】

該酶在哺乳動(dòng)物和其他的脊椎動(dòng)物，蝸牛等軟體動(dòng)物，蝗蟲(chóng)，細(xì)菌和植物中都有發(fā)現(xiàn)，因此是一種功能上相當(dāng)保守和重要的酶類(lèi)。

β-葡萄糖苷酸酶表達(dá)水平的異常會(huì)導(dǎo)致許多疾病。例如，軟腦膜腫瘤(leptomeningeal?adenocarcinoma)患者中有75％顯示該酶水平增高，在脊髓性白血病(myelogenous?leukemia)中則有25％顯示該酶水平增高。【Mayo?ClinProc?1985；60：293-8.】在急性和亞急性細(xì)菌、真菌性腦膜炎以及HIV-1感染中也可以發(fā)現(xiàn)該酶水平的增高。【Lancet?1991；337：734-5】

另一方面，當(dāng)該酶缺乏時(shí)會(huì)導(dǎo)致癥。其癥狀包括黏多糖儲(chǔ)積病，肝脾腫大以及骨骼變化等。【J.Pediat.82：249-257，1973】β-葡萄糖苷酸酶缺乏還可能引起胎兒水腫。【Am.J.Med.?Genet.42：693-695，1992】

通過(guò)基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細(xì)胞株、LPS+的Ecv304細(xì)胞株胸腺、正常成纖維細(xì)胞1024NC、Fibroblast，生長(zhǎng)因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長(zhǎng)因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長(zhǎng)因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細(xì)胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細(xì)胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門(mén)癌中，本發(fā)明的多肽的表達(dá)譜與人β-葡萄糖苷酸酶的表達(dá)譜非常近似，因此二者功能也可能類(lèi)似。本發(fā)明被命名為人β-葡萄糖苷酸酶11.88。

由于如上所述人β-葡萄糖苷酸酶11.88蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過(guò)程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過(guò)程的人β-葡萄糖苷酸酶11.88蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人β-葡萄糖苷酸酶11.88蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開(kāi)發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽——人β-葡萄糖苷酸酶11.88以及其片段、類(lèi)似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼人β-葡萄糖苷酸酶11.88的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼人β-葡萄糖苷酸酶11.88的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供生產(chǎn)人β-葡萄糖苷酸酶11.88的方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供針對(duì)本發(fā)明的多肽——人β-葡萄糖苷酸酶11.88的抗體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了針對(duì)本發(fā)明多肽——人β-葡萄糖苷酸酶11.88的模擬化合物、拮抗劑、激動(dòng)劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供診斷治療與人β-葡萄糖苷酸酶11.88異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中570-896位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-2365位的序列。

本發(fā)明另外涉及一種含有本發(fā)明多核苷酸的載體，特別是表達(dá)載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細(xì)胞，包括轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)染的宿主細(xì)胞；一種包括培養(yǎng)所述宿主細(xì)胞和回收表達(dá)產(chǎn)物的制備本發(fā)明多肽的方法。