[發明專利]一種新的多肽——細胞核基質p84蛋白39.27和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00116446.5
• 申請日: 2000-06-12
• 公開（公告）號: CN1327994A
• 公開（公告）日: 2001-12-26
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/00;C07K16/18;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——細胞核基質p84蛋白39.27，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

大多數核的代謝活動中發揮著重要的作用，涉及復制、轉錄以及RNA的拼接、轉運(Berezney?and?Coffey，1975；Ciejek?et?al.，1983；Zeitlin?et?al.，1989)，其中，為數眾多的核基質成員發揮著各不相同的功能。P84是一種核基質蛋白，分子量為84Kd，位于細胞的亞核區域，它與RNA的加工密切相關。P84需要p110^RB(成視網膜細胞瘤(Retinoblastoma，RB)蛋白)的協同定位，與p110^RB的氨基末端的一個結構上限定的區域發生結合。而且，不論體內或是體外實驗都證明p84優先地結合到功能性活化形式的p110^RB上。因此可見，在細胞亞核區域的RNA代謝反應中，p110^RB的氨基末端部分地發揮了便于生長促進因子結合的功能。大多數的p84聚集在重疊的或者相連的p110^RB高濃度區域，同時，p84也能使PB蛋白相對地集中在一起。

P84蛋白在體內的所有組織中都發現有表達，并且也在整個細胞周期的所有階段上都有表達，p110^RB也如此(Lee?et?al.，1987)，但它在各個階段上表現出的活性有很大的差異。與其它的一些涉及拼接和轉錄機制的組分分子一樣，p84是核基質的一個主要成員，能夠與其它一些蛋白共同結合到RB的基因產物上。P84能夠優先地與p110^RB的磷酸鹽異構形式相結合，這個過程主要發生在細胞周期的G1階段上，因為在該階段p110^RB的功能是最活躍的(Goodrich?et?al.，1994)，并且這時p110^RB還能夠和核基質相結合(Mancini?et?al.，1994)。

RB蛋白的腫瘤遏制能力依賴于它的羧基端區域和一些蛋白的相互作用。將不同的RB等位基因轉染入細胞，能夠導致細胞生長發生阻滯(Qin?et?al.，1992)，這種現象為癌癥的治療提供了一種新的途徑。采用微量注射的方法將RB的等位基因注射入處于細胞周期G1階段上的腫瘤細胞內，明顯地減少了細胞的腫瘤發生率，證明了其編碼蛋白的腫瘤遏制能力(Bookstein?and?Lee，1991)。

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與細胞核基質p84蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為細胞核基質p84蛋白39.27。

由于如上所述細胞核基質p84蛋白39.27蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的細胞核基質p84蛋白39.27蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新細胞核基質p84蛋白39.27蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——細胞核基質p84蛋白39.27以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼細胞核基質p84蛋白39.27的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼細胞核基質p84蛋白39.27的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產細胞核基質p84蛋白39.27的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——細胞核基質p84蛋白39.27的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——細胞核基質p84蛋白39.27的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與細胞核基質p84蛋白39.27異常相關的疾病的方法。