[發(fā)明專利]一種新的多肽——雌激素受體相關(guān)蛋白24.31和編碼這種多肽的多核苷酸

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00116417.1
• 申請(qǐng)日: 2000-06-12
• 公開（公告）號(hào): CN1328019A
• 公開（公告）日: 2001-12-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/435
• 分類號(hào): C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，本發(fā)明描述了一種新的多肽——雌激素受體相關(guān)蛋白24.31，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

于一些特定細(xì)胞的核上，它能夠特異性結(jié)合雌激素，從而使細(xì)胞作出應(yīng)激性反應(yīng)。在一些人的乳腺癌細(xì)胞中，存在一種反常的雌激素受體(estrogenreceptor，ER)，其反常現(xiàn)象表現(xiàn)為帶電荷配體不能夠正常地結(jié)合到細(xì)胞核中或者受體蛋白在配體缺失的情況下與細(xì)胞核發(fā)生相互作用(RaamS，RobertN，PappasCA，TamuraH，1998)。對(duì)人ER的A/B區(qū)域進(jìn)行定點(diǎn)突變?cè)囼?yàn)，發(fā)現(xiàn)已經(jīng)發(fā)生突變的ER最后也能存在于正常的子宮組織中，與其說(shuō)它是腫瘤特異性突變，卻更表現(xiàn)為基因多態(tài)現(xiàn)象(GarciaT，LehrerS，BloomerWD，SchachterB，1988；GarciaT，Sanchez?Met?al.，1989)。因此，這種反常的雌激素受體稱為雌激素受體相關(guān)蛋白。

在正常的子宮組織中，也能找到一些突變的ER?mRNA(Fuqua?SAW，Allred?DCet?al.，1991)。已經(jīng)從人的T-47D_co乳腺癌細(xì)胞系中已經(jīng)分離到能夠抵抗抗雌激素的cDNA克隆，這些突變的ER?cDNA鏈中含有移碼突變，由其編碼產(chǎn)生的雌激素受體相關(guān)蛋白在第二個(gè)鋅指蛋白結(jié)構(gòu)的后面被截?cái)啵蛘咴诮咏谖鍌€(gè)外顯子末端處被截?cái)啵@種現(xiàn)象與核定位信號(hào)的框內(nèi)刪除相似(Grahame?ML，Krett?NLet?al.，1990)。

發(fā)生突變的ER?cDNA克隆的5’末端核苷酸序列與正常的人ER?mRNA相同，但是其3’末端的核苷酸序列卻存在很大的分歧。雌激素受體相關(guān)蛋白缺少一些重要的結(jié)構(gòu)功能性區(qū)域，其中包括正常ER蛋白所擁有的荷爾蒙結(jié)合區(qū)域(Kumar?V，Green?Set?al.，1987)。然而，往往在外顯子和內(nèi)含子相交結(jié)的區(qū)段上，雌激素受體相關(guān)蛋白與正常雌激素受體蛋白在序列上的分歧相對(duì)低于其它的一些區(qū)域(Ponglikitmongkol?M，GreenS，ChambonP，1988)。

雌激素受體突變導(dǎo)致受體對(duì)雌激素的低水平結(jié)合，含有雜合的B變種ER基因的婦女往往比那些含有正常兩條ER鏈的婦女更易產(chǎn)生自發(fā)性流產(chǎn)現(xiàn)象(FuquaSAW，F(xiàn)itzgerald?SD?et?al.，1991)。

通過(guò)基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細(xì)胞株、LPS+的Ecv304細(xì)胞株胸腺、正常成纖維細(xì)胞1024NC、Fibroblast，生長(zhǎng)因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長(zhǎng)因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長(zhǎng)因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細(xì)胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細(xì)胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發(fā)明的多肽的表達(dá)譜與雌激素受體相關(guān)蛋白的表達(dá)譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為雌激素受體相關(guān)蛋白24.31。

由于如上所述雌激素受體相關(guān)蛋白24.31蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過(guò)程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過(guò)程的雌激素受體相關(guān)蛋白24.31蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新雌激素受體相關(guān)蛋白24.31蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽——雌激素受體相關(guān)蛋白24.31以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼雌激素受體相關(guān)蛋白24.31的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼雌激素受體相關(guān)蛋白24.31的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供生產(chǎn)雌激素受體相關(guān)蛋白24.31的方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供針對(duì)本發(fā)明的多肽——雌激素受體相關(guān)蛋白24.31的抗體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了針對(duì)本發(fā)明多肽——雌激素受體相關(guān)蛋白24.31的模擬化合物、拮抗劑、激動(dòng)劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供診斷治療與雌激素受體相關(guān)蛋白24.31異常相關(guān)的疾病的方法。