[發明專利]一種新的多肽——人突觸體結合蛋白11.66和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00116331.0
• 申請日: 2000-06-05
• 公開（公告）號: CN1326963A
• 公開（公告）日: 2001-12-19
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人突觸體結合蛋白11.66，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

運輸小泡。它們在細胞的內吞，外排，細胞內消化，蛋白質的定向傳輸，解毒和神經遞質的釋放等一系列細胞生命活動中起重要的作用。小泡與細胞膜結構的融合是其中的關鍵步驟。研究發現，有幾種非常保守的蛋白家族參與這一過程。例如，在神經元突觸中，與小泡膜結合的蛋白小突觸小泡蛋白(synaptobrevin/VAMP)，靶細胞(器)膜上的蛋白突觸融合蛋白(syntaxin)和突觸體結合蛋白25(SNAP-25，synaptosome-associated?protein?of?25kDa)構成的復合物稱為SNAP受體(SNARE)。在運輸小泡/靶細胞(器)膜上，SNAP可以和SNARE復合物結合，運輸小泡和靶細胞器膜的融合才能夠開始。因此，這些蛋白在膜融合過程中起到結合位點的作用，為小泡的定向傳輸創造條件。【JBiol?Chem?1996?Jun?7；271(23)：13300-3】

除了在小泡融合中的作用以外，SNAP還在精子頂體反應中起作用。在精子和卵子結合后，卵子會刺激精子頂體囊泡的細胞外分泌，并最終使精子和卵子膜相融合，完成受精。【J?Biol?Chem，Vol.273，Issue?38，24355-24359，September18，1998】

SNAP-25幾乎只在腦中表達，而它的人突觸體結合蛋白23，SNAP-23則在幾乎所有的組織中都有發現。

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與人突觸體結合蛋白23的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人突觸體結合蛋白11.66。

由于如上所述人突觸體結合蛋白11.66蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人突觸體結合蛋白11.66蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人突觸體結合蛋白11.66蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人突觸體結合蛋白11.66以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人突觸體結合蛋白11.66的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人突觸體結合蛋白11.66的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人突觸體結合蛋白11.66的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人突觸體結合蛋白11.66的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人突觸體結合蛋白11.66的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人突觸體結合蛋白11.66異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中140-460位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-1178位的序列。

本發明另外涉及一種含有本發明多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本發明多肽的方法。