[發明專利]一種新的多肽——人LAR跨膜的蛋白－酪氨酸磷酸酯酶作用蛋白liprins－α213.97和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00116324.8
• 申請日: 2000-06-05
• 公開（公告）號: CN1326958A
• 公開（公告）日: 2001-12-19
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽--人LAR跨膜的蛋白-酪氨酸磷酸酯酶作用蛋白liprins-α213.97，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

酪氨酸磷酸酯酶介導，其中一些

延緩了從細胞表面到細胞核的信息傳遞，另一些控制細胞骨架的有機構成。這些信號蛋白的酪氨酸磷酸酯化程度是由蛋白-酪氨酸激酶和蛋白-酪氨酸磷酸酯酶的活性決定，上述兩種酶都是大的基因家族，編碼跨膜型和細胞內部型酶(Hanks，S.K.，Hunter，T.，1995；Saito?H.，1993)。

LAR跨膜的蛋白-酪氨酸磷酸酯酶作用蛋白家族(liprins)在神經軸突的定向和乳腺的生長發育中發揮功能。在培養細胞中，LAR能夠結合到細胞內，卷曲的LAR作用蛋白的離散末端能夠相互纏繞，從而聚集在一個焦點處；并且，這些蛋白的相互作用也調節了細胞矩陣?；谛蛄械南嗨菩院徒Y合特性，liprins家族可細分為α型liprins和β型liprins兩種。兩種類型的liprins是C末端的非卷曲區域都能夠結合到膜末梢的磷酸酯酶區域，并且都能夠通過它們的N末端卷曲區域同源二聚化。因而，liprins能夠形成多化合價的蛋白，潛在地形成較為復雜的結構。

一些liprins的mRNA在許多組織中都有分布，而另外一些主要表達在腦中。Liprins-α2基因編碼一條含有1257個氨基酸的蛋白它與liprins-α1有72％的序列相似性，與liprins-β1有26％的相似性。

進行共表達研究表明liprins-α2變更了LAR細胞的定位，并且還能誘導LAR的聚集。Liprins能夠將LAR家族酪氨酸磷酸酯酶定位到質膜的特定位點處，并且可能隨著細胞外環境的改變調節它們之間的相互作用，以及它們與底物的結合。在單感染細胞中，LAR均勻的表達在整個質膜上，而Liprins-α2在邊緣處散布成大的斑點狀結構。LAR和Liprins-α2在COS細胞中進行共表達實驗表明，發現它們能夠協同定位，但是整個系統中Liprins-α2的表達與單單由Liprins-α2轉染細胞中的表達相同，因此LAR的表達并不變更Liprins-α2的定位，而Liprins-α2的表達卻能夠改變LAR的分布，它能夠使LAR募集起來并且簇化。

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與人LAR跨膜的蛋白-酪氨酸磷酸酯酶作用蛋白liprins-α2的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人LAR跨膜的蛋白-酪氨酸磷酸酯酶作用蛋白liprins-α213.97。

由于如上所述人LAR跨膜的蛋白-酪氨酸磷酸酯酶作用蛋白liprins-α213.97蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人LAR跨膜的蛋白-酪氨酸磷酸酯酶作用蛋白liprins-α213.97蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人LAR跨膜的蛋白-酪氨酸磷酸酯酶作用蛋白liprins-α213.97蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽--人LAR跨膜的蛋白-酪氨酸磷酸酯酶作用蛋白liprins-α213.97以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人LAR跨膜的蛋白-酪氨酸磷酸酯酶作用蛋白liprins-α213.97的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人LAR跨膜的蛋白-酪氨酸磷酸酯酶作用蛋白liprins-α213.97的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人LAR跨膜的蛋白-酪氨酸磷酸酯酶作用蛋白liprins-α213.97的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽--人LAR跨膜的蛋白-酪氨酸磷酸酯酶作用蛋白liprins-α213.97的抗體。