[發明專利]一種新的多肽——人1,4,5－三磷酸肌醇受體蛋白13.42和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00116319.1
• 申請日: 2000-06-05
• 公開（公告）號: CN1326953A
• 公開（公告）日: 2001-12-19
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人1，4，5-三磷酸肌醇受體蛋白13.42，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

的反應能力依賴于細胞具有特殊的受體。許多信號分子是以非常低的濃度，非常高的親和力與其互補的受體結合，以保證細胞僅對那些啟動或調制細胞特有功能的信號分子作出反應。不同細胞對同一種激素可能具有不同的受體，同一種信號分子可能與不同類型的受體結合以啟動細胞的不同反應。在生物體內往往存在著多種不同類型的信號通道，如cAMP信號通路、磷脂酰肌醇信號通路、具有酪氨酸蛋白激酶活性的受體信號通路等。其中磷脂酰肌醇信號通路是一通過G蛋白偶聯的信號通路，其通過質膜上磷脂酰肌醇代謝產生的兩個第二信使：1，4，5-三磷酸肌醇(IP₃)和二酰基甘油(DG)，使細胞外信號轉換為細胞內信號。這兩個第二信使分別調節兩個不同的通路，IP₃動員細胞內源鈣到細胞溶質，提高了胞內的鈣濃度，DG刺激蛋白激酶C(PKC)活性，PKC可以磷酸化底物蛋白。并活化Na⁺/H⁺交換引起細胞內PH值升高。細胞外信號就是通過這條肌醇脂信號通路所產生的IP₃、DG和Ca²⁺(也稱第三信使)信號通路，引起細胞對外界信號的應答。

1，4，5-三磷酸肌醇受體蛋白即是細胞內鈣離子釋放通路的重要組成成分，在生物體內參與多種重要的信號途徑。該蛋白在該離子依賴的T淋巴細胞活化過程中起著重要的調節作用，其突變或表達異常將直接影響體內磷脂酰肌醇信號通路的作用異常，進而引發各種相關的免疫系統紊亂性疾病。1995年，David等人又從人中克隆得到了一新的1，4，5-三磷酸肌醇受體蛋白。該蛋白為一三聚體蛋白，由四個約300KDa的亞單位組成。研究發現，該蛋白氨基酸序列中存在兩個酪氨酸磷酸化位點，一個在蛋白的氨基末端，而另一個在蛋白的C末端。這兩個磷酸化位點是受體與信號分子結合，調節細胞內相應信號應答，啟動細胞內相應反應的重要活性中心。當1，4，5-三磷酸肌醇受體被磷酸化后，即被激活并與細胞內的第二信使IP₃結合，以刺激IP₃結合的作用活性。IP₃即動員內質網中的Ca²⁺釋放到細胞溶質，升高細胞溶質中的Ca²⁺濃度。DG通過蛋白激酶C活化Na⁺/H⁺交換，減少細胞內H⁺濃度，增高細胞內PH。PKC磷酸化特殊蛋白上的絲/蘇暗算殘基，提高胞內PH值及IP₃使胞內Ca²⁺濃度提高，以啟動細胞內相應基因的轉錄及蛋白的合成[David?J.Harnick，Thottala?Jayataman?et?al.，1995，J?BiolChem，270(6)：2833]。

由上可知，1，4，5-三磷酸肌醇受體蛋白在細胞內多種重要的信號途徑中均起著極為重要的調節作用。該蛋白的突變或表達異常將直接影響體內信號的傳導，進而影響一系列相關的生物反應的進行。該蛋白在生物體內通常在T淋巴細胞中高表達，其表達異常將影響T淋巴細胞對外界侵入產生正常的應答反應，進而引發各種相關的疾病。該蛋白在生物體內通常與各種免疫系統疾病、代謝及發育紊亂性疾病、相關組織的腫瘤及癌癥等疾病的發生密切相關。

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與人I型1，4，5-三磷酸肌醇受體的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人1，4，5-三磷酸肌醇受體蛋白13.42。