[發明專利]新的人C型外源凝集素樣受體、其編碼序列及用途

無效

• 申請號: 00116291.8
• 申請日: 2000-05-31
• 公開（公告）號: CN1325874A
• 公開（公告）日: 2001-12-12
• 發明（設計）人: 曹雪濤;章衛平;萬濤;陳濤涌
• 申請（專利權）人: 上海華晨生物技術研究所
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/63;C12N15/64;C07H21/00;C12Q1/68;G01N33/68;G06K9/00;A61K38/16;A61P35/00;A61P31/12
• 代理公司: 上海專利商標事務所
• 代理人: 徐迅

本發明屬于生物技術和醫學領域，具體地說，本發明涉及新的編碼人C型外源凝集素樣受體(C?lectin-like?molecule，簡稱為“CLL-1”)的多核苷酸，以及此多核苷酸編碼的多肽。這種受體為Ⅱ型穿膜糖蛋白，在自然殺傷細胞(natural?killer?cell，NK細胞)上表達。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的用途和制備。具體地說，本發明的多肽是一種新的與腫瘤和病毒感染的治療有關的細胞表面分子。NK細胞是淋巴細胞的一種，主要存在于血液和淋巴樣組織中，能對腫瘤細胞和病毒感染的細胞進行殺傷。由于NK細胞無特異性抗原識別受體，這種殺傷是非特異性的。近年的研究表明，NK細胞的殺傷受主要組織相容性復合物(majorhistocompatibility?complex,MHC)Ⅰ類分子作用，NK細胞無需致敏即能殺傷不表達或低表達主要組織相容性抗原的腫瘤細胞(Yokoyama?and?Seaman,1993)，對于可下調MHCⅠ類分子表達的病毒感染或腫瘤細胞，NK細胞的作用是對T細胞免疫調節作用的重要補充。

NK細胞受體是在NK細胞上表達的一系列表面分子，在NK細胞與靶細胞的識別，NK細胞介導的靶向性殺傷作用和信號傳導的過程中發揮重要作用。NK細胞受體可根據不同的角度進行分類(Yokoyama?et?al,1995):1．按NK細胞受體的配體是否為MHCⅠ類分子，可將NK細胞受體分為MHCⅠ類分子受體和非MHCⅠ類分子受體；2．按受體結構特征可分為免疫球蛋白超家族(IgSF)和C型外源凝集素超家族(C-lectin?SF)；3．以NK細胞受體基因定位可分為KIR家族、CD94/NKG2家族、Ly家族和NKR-P1家族等；4．按功能可分為抑制性受體和激活性受體。C型外源凝集素(C-type?lectin)受體家族是NK細胞受體家族的一個重要部分，目前發現的C型外源凝集素類NK細胞受體包括小鼠的Ly49家族、NKR-P1家族及人的NKG2家族等，由NK基因復合物編碼，小鼠的編碼基因位于第6號染色體，人的編碼基因位于第12號染色體。還有一些由單拷貝基因編碼的NK細胞C型外源凝集素受體，包括CD94,CD69,AICL(activation-induced?C-type?lectin)等。這些基因產物均為表達在NK細胞上的Ⅱ型穿膜蛋白，有Ca²⁺依賴糖基識別區，在Ca²⁺存在的條件下可與配體結合，在激活或抑制NK細胞殺傷作用過程中發揮作用(Lanier?et?al,1998)。

NK細胞可表達一種或多種C型外源凝集素樣NK細胞受體，可與相應的MHCⅠ類分子配體結合。抑制性受體與配體結合后傳遞抑制信號，即可抑制NK細胞對靶細胞的殺傷，而激活性受體與配體結合后，則可刺激NK細胞對靶細胞進行殺傷。NK細胞受體與配體的結合具有廣泛性，例如，Ly49C可與多種H-2分子結合，且與其他Ly49分子具有交叉反應(Brennan?et?al,1?995)。因此，發現NK細胞受體家族的新成員對于NK細胞受體與配體的結合，信號傳導等機制研究具有重要意義。

Ly49家族和CD94/NKG2家族產物多為NK細胞抑制性受體，也有一些為激活性受體；而NKR-P1家族產物多為NK細胞激活性受體。目前為止，Ly49家族至少有9個成員，NKG2家族至少有5個成員，與CD94共價結合發揮作用。迄今為止已發現多個NKR-P1基因，每個均有等位基因。隨著分子生物學技術的發展，不斷有新的C型外源凝集素樣NK細胞受體被發現。這對于進一步了解NK非特異性免疫機制并應用NK細胞對腫瘤及病毒感染進行治療有很大幫助。

研究已表明，C型外源凝集素樣受體的異常或缺失與許多疾病相關，因此，為治療目的研究和開發人C型外源凝集素樣受體有重要意義。

本發明的目的是提供一種新的人C型外源凝集素樣受體(C?lectin-like?molecule，簡稱為“CLL-1”)蛋白以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一目的是提供編碼這些多肽的多核苷酸。

本發明的另一目的是提供生產這些多肽的方法以及該多肽和編碼序列的用途。

在本發明的第一方面，提供新穎的分離出的CLL-1多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽、或其保守性變異多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。