[發明專利]一種新的多肽——人鐵硫蛋白9.57和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00116241.1
• 申請日: 2000-05-31
• 公開（公告）號: CN1325892A
• 公開（公告）日: 2001-12-12
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽--人鐵硫蛋白9.57，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

線粒體呼吸鏈由四個寡聚蛋白復合體組成，這些寡聚蛋白復合體按照一定的順序組成一條呼吸鏈，這條呼吸鏈從各種不同的底物得到電子，再將電子運至分子氧。其中一個寡聚蛋白復合體叫泛素-細胞色素C還原酶(bc1復合體)。這種廣泛存在酶的基本特征無論在動物，還是在植物線粒體，葉綠體和細菌光合鏈以及一些需氧細菌呼吸鏈中都是保守的。泛素-細胞色素C還原酶位于線粒體內膜，催化電子從質體醌到細胞色素C。它催化泛素和細胞色素C的氧化還原反應，與植物葉綠體和藍細菌質體醌-質體藍素還原酶功能相似，并且同時也催化質體醌和細胞色素F的氧化還原反應。

電子傳遞系統的成分之一是一個有一個2鐵-2硫束的鐵硫蛋白，這個鐵硫蛋白就是Rieske氏鐵硫蛋白。Rieske氏鐵硫蛋白大約包括190個氨基酸殘基，其鐵硫束通過半胱氨酸殘基和組氨酸殘基絡合。大約128位到152位的氨基酸殘基形成一個大的loop環。最可能完成與鐵配基結合的是半胱氨酸129,134,148和組氨酸151。loop環的后面是3個短的β片層和1個α轉角，從而形成一個部分的圍繞鐵原子結合口袋的β桶狀序列。Rieske氏鐵硫蛋白有兩個非常保守的區域，它們包含了所有結合鐵硫束的氨基酸殘基。這兩個保守區域都有兩個半胱氨酸和一個組氨酸。第一個半胱氨酸和組氨酸是2鐵-2硫的配基，而剩下的半胱氨酸則形成一個二硫鍵。

以下是Rieske氏鐵硫蛋白的兩個非常保守區域特征序列：[1]C-[TK]-H-L-G-C-[LIVT]，第一個C和H是2鐵-2硫的配基。第二個C則形成一個二硫鍵。[2]C-P-C-H-x-[GSA]，第一個C和H是2鐵-2硫的配基。第二個C則形成一個二硫鍵。

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與人鐵硫蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人鐵硫蛋白9.57。

由于如上所述人鐵硫蛋白9.57蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人鐵硫蛋白9.57蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人鐵硫蛋白9.57蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽--人鐵硫蛋白9.57以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人鐵硫蛋白9.57的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人鐵硫蛋白9.57的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人鐵硫蛋白9.57的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽--人鐵硫蛋白9.57的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽--人鐵硫蛋白9.57的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人鐵硫蛋白9.57異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO:1中51-314位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO:1中1-1196位的序列。