[發(fā)明專利]一種新的多肽——人NADH泛醌氧化還原酶21.89和編碼這種多肽的多核苷酸

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• 申請?zhí)枺?/td>: 00115843.0
• 申請日: 2000-05-24
• 公開（公告）號: CN1324938A
• 公開（公告）日: 2001-12-05
• 發(fā)明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C12N15/53
• 分類號: C12N15/53;C12N9/02;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/26;C12Q1/68;A61K38/44
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本發(fā)明屬于生物技術領域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽--人NADH泛醌氧化還原酶21.89，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

酶(復合物Ⅰ)是一種內(nèi)線粒體膜結合多亞基酶復合物。復合物Ⅰ由至少41個亞基組成，其中的七個由線粒體基因組編碼。作為線粒體呼吸鏈的復合物之一，NADH泛醌氧化還原酶的功能是催化NADH魚藤酮敏感的氧化作用以及還原泛醌。該復合物由兩個親水部分以及一個疏水部分組成，親水部分包括黃素蛋白部分以及鐵蛋白部分。黃素蛋白部分由51-,24-，以及10-KD亞基構成，它們都是由核基因編碼的。這一部分在氧化NADH中起到催化作用，因其與黃素蛋白及NAD結合有關。51-KD亞基中的四細胞核Fe-S中心與24-KD亞基的二細胞核Fe-S中心參與電子轉移(de?Coo?RF,Buddiger?P,Smeets?HJ,van?Oost?BA,Genomics?1997Oct15；45(2):434-7)。

人體編碼復合物Ⅰ的10-KD黃素蛋白亞基的基因被命名為NDUFV3基因，該基因位于染色體21q22.3，該基因缺陷將引發(fā)唐氏綜合征，并與癡呆的惡化有關。唐氏綜合征又稱為21-三體綜合征或蒙古癡呆癥，是一種最常見的常染色體疾病，由常染色體畸變引起，三條21號染色體載有相同基因，破壞了遺傳物質(zhì)的平衡，導致胎兒發(fā)育異常，它的特征為頭型小而前后扁平，鼻梁低平，指(趾)骨短，手足第一與第二指(趾)建的空隙大，精神發(fā)育遲緩，染色體異常。

通過基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發(fā)明的多肽的表達譜與人NADH泛醌氧化還原酶的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為人NADH泛醌氧化還原酶21.89。

由于如上所述人NADH泛醌氧化還原酶21.89蛋白在調(diào)節(jié)細胞分裂和胚胎發(fā)育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人NADH泛醌氧化還原酶21.89蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人NADH泛醌氧化還原酶21.89蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽--人NADH泛醌氧化還原酶21.89以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼人NADH泛醌氧化還原酶21.89的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼人NADH泛醌氧化還原酶21.89的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產(chǎn)人NADH泛醌氧化還原酶21.89的方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽--人NADH泛醌氧化還原酶21.89的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽--人NADH泛醌氧化還原酶21.89的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與人NADH泛醌氧化還原酶21.89異常相關的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO:1中599-1160位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO:1中1-2097位的序列。