[發明專利]一種新的多肽——人角蛋白45.87和編碼這種多肽的多核苷酸

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• 申請號: 00115842.2
• 申請日: 2000-05-24
• 公開（公告）號: CN1324859A
• 公開（公告）日: 2001-12-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽--人角蛋白45.87，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

皮細胞都有兩個不同的質膜區域，頂膜區域和基底膜區域。這兩個區域的蛋白和磷脂組成不同，因此其執行的功能也不同，具有一定的方向性。因此，上皮細胞的極性化是上皮細胞執行生理功能的一個基礎。【Semin?Nephrol?1995Jul；15(4):272-84】

細胞角蛋白是與細胞極性化有關的一類蛋白。角蛋白表達異常會引起上皮細胞極性化的異常從而導致疾病。角蛋白19是在周皮中發現的一種角蛋白。這是一種暫時的包被在發育中的表皮的最外層的一層膜。角蛋白19經常在培養的細胞和一些癌細胞中表達。角蛋白19與上皮細胞的頂膜結合，而不與其底膜結合。【J?Cell?Sci?1994?Nov；107(Pt11):3145-51】角蛋白表達下調會導致微絨毛數目的減少，上皮細胞頂部纖維機動蛋白不能很好組織，頂部微管蛋白異常，以及頂膜蛋白缺乏或者重新分配。在角蛋白19表達水平很低的上皮細胞中，位于頂膜上的一類去詬劑不溶性的蛋白不能表達。而一種位于頂膜的跨膜蛋白，蔗糖酶異麥芽糖酶也錯誤的極性化了。【J?Cell?Biol.1997?Apr?21；137(2):359-75】

角蛋白19可以特異的糾正許多不同的鹼類角蛋白的不平衡的表達。【J.Molec.Evol.27:203-211,1988】這一功能在人類的胚胎發育期就存在了。【Am.J.Hum.Genet.43:630-637,1988】

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與人角蛋白19的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人角蛋白45.87。

由于如上所述人角蛋白45.87蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人角蛋白45.87蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人角蛋白45.87蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽--人角蛋白45.87以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人角蛋白45.87的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人角蛋白45.87的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人角蛋白45.87的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽--人角蛋白45.87的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽--人角蛋白45.87的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人角蛋白45.87異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO:1中230-1483位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO:1中1-2287位的序列。

本發明另外涉及一種含有本發明多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本發明多肽的方法。

本發明還涉及一種能與本發明多肽特異性結合的抗體。