[發明專利]一種新的多肽——人嗜堿核蛋白22.55和編碼這種多肽的多核苷酸

在審

• 申請號: 00115817.1
• 申請日: 2000-05-24
• 公開（公告）號: CN1324844A
• 公開（公告）日: 2001-12-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽--人嗜堿核蛋白22.55，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

物的多種不同的蛋白中存在著兩種不同的結構，在生物體內參與調節蛋白與序列特異DNA的結合，這兩個蛋白結構即是鋅指結構基序和基本螺旋-嚕噗-螺旋(HLH)結構基序。TFⅢ蛋白是第一個克隆得到的RNA多聚酶Ⅲ轉錄調節因子，該蛋白的氨基酸序列中含有多個由約30個氨基酸殘基組成的鋅指結構基序。研究發現，鋅指結構基序由多個重復配對的半胱氨酸及組氨酸所組成，具有如下所示的特征性序列片段：C-X_2-4-C-X₁₂-H-X_3-4-H(4,5)；其中X表示任意氨基酸殘基；半胱氨酸與組氨酸與鋅原子形成配位鍵，結合鋅原子；其它變化的氨基酸殘基負責介導蛋白與其它分子的相互作用。一個鋅指蛋白中可能含有一個或多個如上所述的鋅指基序，這些結構基序在生物體內獨立完成自己的生理學功能。在很多情況下，含有鋅指結構基序的蛋白與特殊的雙鏈及單鏈DNA序列相互作用，起著轉錄調節因子的作用。現有研究發現，鋅指結構基序不僅在一些組織的基因表達過程中起重要的調節作用，其在生物體的生長、發育調節過程亦起著非常關鍵的作用。

近年的研究發現，在高等生物體內還存在著一類蛋白，該類蛋白在肌肉及胚胎早期發育過程中起著重要的調節作用，其組成了一獨立的蛋白家族即嗜堿核蛋白家族。該類蛋白為角質細胞蛋白，其三分之二的成員的蛋白序列C末端含有三個保守的鋅指結構基序，這些鋅指基序在蛋白的作用活性過程中起重要的調控作用。該蛋白家族的成員多在細胞核中表達，其在成體終末分化及角質組織發育過程中起重要的調控作用，該類蛋白的突變或表達異常將導致生物體相關組織如肌肉、角質等組織的生長及發育異常。

1992年，Hung等人從人中克隆得到了一新的嗜堿核蛋白，該蛋白的氨基酸序列的C末端構成一α-螺旋結構及三個相鄰的鋅指結構基序，其鋅指結構基序中還含有一由六個氨基酸殘基組成的序列片段。該蛋白亦在細胞核內高表達，其結構基序的突變或表達異常將導致蛋白在體內的作用異常，進而引發各種相關的代謝及發育紊亂性疾病[Hung?Tseng,Howard?Green?et?al.,1992,Prog?Natl?AcadSci?USA,89:10311-10315]。該蛋白在生物體內通常與一些胚胎發育紊亂性疾病、肌肉及角質組織發育異常及相關組織的腫瘤及癌癥等疾病的發生密切相關。其還可用于診斷及治療上述各種相關疾病。

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與人嗜堿核蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人嗜堿核蛋白22.55。

由于如上所述人嗜堿核蛋白22.55蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人嗜堿核蛋白22.55蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人嗜堿核蛋白22.55蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽--人嗜堿核蛋白22.55以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人嗜堿核蛋白22.55的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人嗜堿核蛋白22.55的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人嗜堿核蛋白22.55的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽--人嗜堿核蛋白22.55的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽--人嗜堿核蛋白22.55的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人嗜堿核蛋白22.55異常相關的疾病的方法。