[發明專利]一種新的多肽——人p34cdc2相關蛋白激酶9和編碼這種多肽的多核苷酸

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• 申請號: 00115708.6
• 申請日: 2000-05-16
• 公開（公告）號: CN1323894A
• 公開（公告）日: 2001-11-28
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C12N15/54
• 分類號: C12N15/54;C12N9/12;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/48;C12Q1/68;A61K38/45
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人p34cdc2相關蛋白激酶9，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

自真核生物中鑒別的一類最大的已知蛋白超家族由蛋白激酶組成，該家族成員都有一段保守的催化核心，蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶以及蛋白酪氨酸激酶的保守催化核心相同。這些酶利用ATP(或GTP)的γ-磷酸酯以生成磷酸單酯，并把蛋白(絲氨酸及蘇氨酸上)的乙醇基團與/或蛋白(酪氨酸上)的酚基作為磷酸酯受體。該超家族又可分為兩個主要的亞門：蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶以及蛋白酪氨酸激酶。真核生物蛋白激酶的激酶功能域傳遞催化活性。

細胞分裂，細胞生長以及細胞分化是復雜的過程，在很大程度上是由磷酸化/去磷酸化調控的，因而蛋白激酶以及磷酸酶在細胞調控中起到重要作用。蛋白激酶家族成員調節多種蛋白的活性，包括激酶，磷酸酶，轉錄因子，細胞周期蛋白，代謝酶以及結構蛋白。細胞周期至少部分是由稱為細胞周期蛋白依賴激酶(CDKS)的蛋白激酶亞家族所調控的。這些蛋白激酶包括一個催化域，它需要與名為細胞周期蛋白的調節亞基相連，這對于復合物的激酶活性是必須的。細胞周期蛋白/細胞周期蛋白依賴激酶復合物在細胞周期的不同點都是必須的。在多種人類腫瘤中，細胞周期蛋白依賴激酶去調控或發生突變。p34cdc2蛋白激酶在細胞周期中調控重要的轉換。現已發現人體中有多種p34cdc2蛋白激酶相關蛋白，它們在結構上與p34cdc2有高度同源性。其中，cdk3基因，cdc2以及cdk2基因的蛋白產物作用于哺乳動物的細胞周期調控。Cdc2-相關激酶的大家族與細胞周期蛋白的大家族共同調控細胞周期(van?der?Heuvel,S.and?Harlow,E.,Science?1993,262,2050-2054)。

PCTAIRE-2是一種細胞周期蛋白依賴激酶，也是一種蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶，因為含有與p34cdc2蛋白激酶相關的N-端延伸域，又稱為p34cdc2相關蛋白激酶。PCTAIRE-2與多種細胞增殖疾病有關，例如牛皮蘚，血管病以及癌癥(Meyerson?M,Enders?GH,Wu?CL,Su?LK,Gorka?C,Nelson?C,Harlow?E,TsaiLH,EMBO?J?1992?Aug；11(8):2909-17)。

通過基因芯片的分析發現，在胸腺、睪丸、肌肉、脾臟、肺、皮膚、甲狀腺、肝、PMA+的Ecv304細胞株、PMA-的Ecv304細胞株、未饑餓的L02細胞株、砷刺激1小時的L02細胞株、砷刺激6小時的L02細胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小腸、胎大腸、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎腎、胎脾、胎腦、胎肺以及胎心中，本發明的多肽的表達譜與人p34cdc2相關蛋白激酶的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人p34cdc2相關蛋白激酶9。

由于如上所述人p34cdc2相關蛋白激酶9蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人p34cdc2相關蛋白激酶9蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人p34cdc2相關蛋白激酶9蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人p34cdc2相關蛋白激酶9以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人p34cdc2相關蛋白激酶9的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人p34cdc2相關蛋白激酶9的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人p34cdc2相關蛋白激酶9的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人p34cdc2相關蛋白激酶9的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人p34cdc2相關蛋白激酶9的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人p34cdc2相關蛋白激酶9異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。