[發(fā)明專利]一種新的多肽——DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I－12和編碼這種多肽的多核苷酸

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• 申請?zhí)枺?/td>: 00115703.5
• 申請日: 2000-05-16
• 公開（公告）號: CN1323901A
• 公開（公告）日: 2001-11-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C12N15/61
• 分類號: C12N15/61;C12N9/90;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/533;C12Q1/68;A61K38/52
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1、一種分離的多肽-DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ-12，其特征在于它包含有：SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、類似物或衍生物。

2、如權(quán)利要求1所述的多肽，其特征在于所述多肽、類似物或衍生物的氨基酸序列具有與SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列至少95％的相同性。

3、如權(quán)利要求2所述的多肽，其特征在于它包含具有SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列的多肽。

4、一種分離的多核苷酸，其特征在于所述多核苷酸包含選自下組中的一種：

(a)編碼具有SEQ?ID?NO:2所示氨基酸序列的多肽或其片段、類似物、衍生物的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；或

(c)與(a)或(b)有至少70％相同性的多核苷酸。

5、如權(quán)利要求4所述的多核苷酸，其特征在于所述多核苷酸包含編碼具有SEQ?IDNO:2所示氨基酸序列的多核苷酸。

6、如權(quán)利要求4所述的多核苷酸，其特征在于所述多核苷酸的序列包含有SEQ?ID?NO:1中198-521位的序列或SEQ?ID?NO:1中1-934位的序列。

7、一種含有外源多核苷酸的重組載體，其特征在于它是由權(quán)利要求4-6中的任一權(quán)利要求所述多核苷酸與質(zhì)粒、病毒或運(yùn)載體表達(dá)載體構(gòu)建而成的重組載體。

8、一種含有外源多核苷酸的遺傳工程化宿主細(xì)胞，其特征在于它是選自于下列一種宿主細(xì)胞：

(a)用權(quán)利要求7所述的重組載體轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo)的宿主細(xì)胞；或

(b)用權(quán)利要求4-6中的任一權(quán)利要求所述多核苷酸轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo)的宿主細(xì)胞。

9、一種具有DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ-12活性的多肽的制備方法，其特征在于所述方法包括：

(a)在表達(dá)DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ-12條件下，培養(yǎng)權(quán)利要求8所述的工程化宿主細(xì)胞；

(b)從培養(yǎng)物中分離出具有DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ-12活性的多肽。

10、一種能與多肽結(jié)合的抗體，其特征在于所述抗體是能與DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ-12特異性結(jié)合的抗體。

11、一類模擬或調(diào)節(jié)多肽活性或表達(dá)的化合物，其特征在于它們是模擬、促進(jìn)、拮抗或抑制DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ-12的活性的化合物。

12、如權(quán)利要求11所述的化合物，其特征在于它是SEQ?ID?NO:1所示的多核苷酸序列或其片段的反義序列。

13、一種權(quán)利要求11所述化合物的應(yīng)用，其特征在于所述化合物用于調(diào)節(jié)DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ-12在體內(nèi)、體外活性的方法。

14、一種檢測與權(quán)利要求1-3中的任一權(quán)利要求所述多肽相關(guān)的疾病或疾病易感性的方法，其特征在于其包括檢測所述多肽的表達(dá)量，或者檢測所述多肽的活性，或者檢測多核苷酸中引起所述多肽表達(dá)量或活性異常的核苷酸變異。

15、如權(quán)利要求1-3中的任一權(quán)利要求所述多肽的應(yīng)用，其特征在于它應(yīng)用于篩選DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ-12的模擬物、激動劑，拮抗劑或抑制劑；或者用于肽指紋圖譜鑒定。

16、如權(quán)利要求4-6中的任一權(quán)利要求所述的核酸分子的應(yīng)用，其特征在于它作為引物用于核酸擴(kuò)增反應(yīng)，或者作為探針用于雜交反應(yīng)，或者用于制造基因芯片或微陣列。

17、如權(quán)利要求1-6及11中的任一權(quán)利要求所述的多肽、多核苷酸或化合物的應(yīng)用，其特征在于用所述多肽、多核苷酸或其模擬物、激動劑、拮抗劑或抑制劑以安全有效劑量與藥學(xué)上可接受的載體組成作為診斷或治療與DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ-12異常相關(guān)的疾病的藥物組合物。

18、權(quán)利要求1-6及11中的任一權(quán)利要求所述的多肽、多核苷酸或化合物的應(yīng)用，其特征在于用所述多肽、多核苷酸或化合物制備用于治療如惡性腫瘤，血液病，HIV感染和免疫性疾病和各類炎癥的藥物。