[發明專利]一種新的多肽——人pax蛋白10和編碼這種多肽的多核苷酸

在審

• 申請號: 00115644.6
• 申請日: 2000-05-09
• 公開（公告）號: CN1322756A
• 公開（公告）日: 2001-11-21
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽--人Pax蛋白10，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

Pax是一個基因家族，Pax基因編碼的蛋白在細胞分化和胚胎發育過程中起到轉錄因子的作用，并且在脊椎動物和低等生物中這類基因是高度保守的。Pax基因的特征為一個成對的框功能域(Paired?Box?domain)，它編碼了一個蛋白功能域幫助識別特異性的DNA序列。成對框功能域(Paired?Box?domain)具有DNA結合活性，在其氨基末端有一個alpha螺旋結構，這對于其結合DNA有重要意義。(Genes?Dev?1991?Apr；5(4):594-604)

已有的研究發現，成對框功能域是由124個氨基酸殘基組成的，在很多生物的很多種蛋白中都有存在，包括哺乳動物的PAX蛋白家族等。雖然成對框功能域的功能目前還不是很明確，但它多數位于PAX等蛋白的N末端，對于PAX蛋白發揮正常的作用有著極其重要的調控意義。

所有的成對框功能域均含有一保守的區域，該區域含有以下一致的序列片段：R-P-C-x(11)-C-V-S，在眾多不同生物的PAX蛋白中均含有這一序列片段，這一結構基序在蛋白發揮正常生理學功能的過程中起著極為重要的作用，PAX蛋白的成對框功能域具體的結構和其染色體定位請參閱相關文獻。(Nat?Genet?1993Apr；3(4):292-8)PAX蛋白可以與DNA結合，這依賴于成對框功能域(Paired?Boxdomain)具有DNA結合活性。Pax基因的表達在生物的發育過程中有重要作用。最近的研究還表明，Pax基因還存在于人的腫瘤組織中，體內和體外的實驗結果都證明了Pax基因是一種可能的致癌基因。(Adv?Clin?Path?1997Oct；1(4):243-255)也有研究證明，Pax基因的表達對于調控生物體器官的早期形成有極其重要的意義。(Cancer?Res?1999?Apr?1；59(7?Supp1):1707s-1709s；discussion?1709s-1710s)此外，還有研究表明，PAX-3和PAX-6與Waardenburg氏綜合癥的發生、治療有關。(Nat?Genet?1993?Apr；3(4):292-8)

通過基因芯片的分析發現，在胸腺、睪丸、肌肉、脾臟、肺、皮膚、甲狀腺、肝、PMA+的Ecv304細胞株、PMA-的Ecv304細胞株、未饑餓的L02細胞株、砷刺激1小時的L02細胞株、砷刺激6小時的L02細胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小腸、胎大腸、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎腎、胎脾、胎腦、胎肺以及胎心中，本發明的多肽的表達譜與人Pax蛋白12的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人Pax蛋白10。

由于如上所述人Pax蛋白10蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人Pax蛋白10蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人Pax蛋白10蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽--人Pax蛋白10以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人Pax蛋白10的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人Pax蛋白10的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人Pax蛋白10的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽--人Pax蛋白10的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽--人Pax蛋白10的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人Pax蛋白10異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；