[發(fā)明專利]一種新的多肽——人Pax蛋白18和編碼這種多肽的多核苷酸

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00115529.6
• 申請(qǐng)日: 2000-04-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN1321663A
• 公開(kāi)（公告）日: 2001-11-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海博德基因開(kāi)發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/435
• 分類號(hào): C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，本發(fā)明描述了一種新的多肽——人Pax蛋白18，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

Pax是一個(gè)基因家族，Pax基因編碼的蛋白在細(xì)胞分化和胚胎發(fā)育過(guò)程中起到轉(zhuǎn)錄因子的作用，并且在脊椎動(dòng)物和低等生物中這類基因是高度保守的。Pax基因的特征為一個(gè)成對(duì)的框功能域(Paired?Box?domain)，它編碼了一個(gè)蛋白功能域幫助識(shí)別特異性的DNA序列。成對(duì)框功能域(Paired?Box?domain)具有DNA結(jié)合活性，在其氨基末端有一個(gè)alpha螺旋結(jié)構(gòu)，這對(duì)于其結(jié)合DNA有重要意義。(Genes?Dev?1991?Apr；5(4)：594-604)

已有的研究發(fā)現(xiàn)，成對(duì)框功能域是由124個(gè)氨基酸殘基組成的，在很多生物的很多種蛋白中都有存在，包括哺乳動(dòng)物的PAX蛋白家族等。雖然成對(duì)框功能域的功能目前還不是很明確，但它多數(shù)位于PAX等蛋白的N末端，對(duì)于PAX蛋白發(fā)揮正常的作用有著極其重要的調(diào)控意義。

所有的成對(duì)框功能域均含有一保守的區(qū)域，該區(qū)域含有以下一致的序列片段：R-P-C-x(11)-C-V-S，在眾多不同生物的PAX蛋白中均含有這一序列片段，這一結(jié)構(gòu)基序在蛋白發(fā)揮正常生理學(xué)功能的過(guò)程中起著極為重要的作用，PAX蛋白的成對(duì)框功能域具體的結(jié)構(gòu)和其染色體定位請(qǐng)參閱相關(guān)文獻(xiàn)。(Nat?Genet?1993Apr；3(4)：292-8)PAX蛋白可以與DNA結(jié)合，這依賴于成對(duì)框功能域(Paired?Boxdomain)具有DNA結(jié)合活性。Pax基因的表達(dá)在生物的發(fā)育過(guò)程中有重要作用。最近的研究還表明，Pax基因還存在于人的腫瘤組織中，體內(nèi)和體外的實(shí)驗(yàn)結(jié)果都證明了Pax基因是一種可能的致癌基因。(Adv?Clin?Path?1997Oct；1(4)：243-255)也有研究證明，Pax基因的表達(dá)對(duì)于調(diào)控生物體器官的早期形成有極其重要的意義。(Cancer?Res?1999?Apr?1；59(7?Suppl)：1707s-1709s；discussion?1709s-1710s)此外，還有研究表明，PAX-3和PAX-6與Waardenburg氏綜合癥的發(fā)生、治療有關(guān)。(Nat?Genet?1993?Apr；3(4)：292-8)

通過(guò)基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在胸腺、睪丸、肌肉、脾臟、肺、皮膚、甲狀腺、肝、PMA+的Ecv304細(xì)胞株、PMA-的Ecv?304細(xì)胞株、未饑餓的L02細(xì)胞株、砷刺激1小時(shí)的L02細(xì)胞株、砷刺激6小時(shí)的L02細(xì)胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小腸、胎大腸、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎腎、胎脾、胎腦、胎肺以及胎心中，本發(fā)明的多肽的表達(dá)譜與人Pax蛋白12的表達(dá)譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為人Pax蛋白18。

由于如上所述人Pax蛋白18蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過(guò)程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過(guò)程的人Pax蛋白18蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人Pax蛋白18蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開(kāi)發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽——人Pax蛋白18以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼人Pax蛋白18的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼人Pax蛋白18的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供生產(chǎn)人Pax蛋白18的方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供針對(duì)本發(fā)明的多肽——人Pax蛋白18的抗體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了針對(duì)本發(fā)明多肽——人Pax蛋白18的模擬化合物、拮抗劑、激動(dòng)劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供診斷治療與人Pax蛋白18異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；