[發明專利]一種新的多肽——人B細胞蛋白酪氨酸激酶13和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00115508.3
• 申請日: 2000-04-29
• 公開（公告）號: CN1321753A
• 公開（公告）日: 2001-11-14
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C12N15/54
• 分類號: C12N15/54;C12N9/12;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/48;C12Q1/68;A61K38/45
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人B細胞蛋白酪氨酸激酶13，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

在過去的幾年中人們已克隆得到了多種編碼酪氨酸特異的蛋白激酶的基因。最早克隆得到的酪氨酸特異的蛋白激酶是病毒變構基因src，隨后，人們又克隆得到了多種病毒原癌基因，這些基因均含有一保守的序列片段，它們所編碼的蛋白均具有蛋白酪氨酸激酶的活性。蛋白酪氨酸激酶家族的成員分布非常廣泛，其中一些激酶的蛋白序列中具有保守的跨膜區域，這些蛋白與一些生長因子受體同源，如表皮生長因子受體同源的erbB原癌基因等；而另一些蛋白酪氨酸激酶，其蛋白序列中不具有保守的跨膜區域，這些蛋白不具有受體活性，如src,fes/fps,yes及abl等[Qian-lin?Hao,Nora?Heisterkamp?et?al.,1989,Molecular?and?Cellular?Biology,9:1587-1593]。

無論是何種類型的蛋白酪氨酸激酶，其在生物體內均催化蛋白酪氨酸殘基的磷酸化過程，是生物體內控制細胞生長、分化及發育等多種信號傳導過程的重要調控機制。生物體內大量的酶就是通過其特殊位點的磷酸化過程來激活，進而催化一些代謝過程的進行。該類蛋白的突變或表達異常將導致相關磷酸化過程的失敗，即相關酶的失活，進而影響一系列相關的代謝途徑的進行，引發各種相關的疾病。

人們已克隆得到多種不同來源的蛋白酪氨酸激酶，1989年，Qian-lin?Hao等人又從人中克隆得到了一新的fes/fps同源的基因，該基因所編碼的蛋白的序列片段中含有高度保守的酪氨酸蛋白激酶家族的功能性結構域，但缺少保守的跨膜區域，因而該蛋白為非受體型酪氨酸蛋白激酶。其為人ABL原癌基因所編碼的酪氨酸激酶，該基因正常的應位于人的第9條染色體上，當其變位至人的第22條染色體上后，其將引發人的慢性嗜粒性白血病等疾病。1993年，Tsukada等人又從人中克隆得到了一新的胞質酪氨酸激酶---BPK，該蛋白為B細胞激酶，在B細胞及骨髓細胞發育的整個過程中均有表達。該蛋白激酶氨基酸序列中含有高度保守的SH1、SH2及SH3結構域，但不含有src型蛋白激酶所具有的十四烷基化信號片段及調控磷酸化位點。研究發現，該蛋白在生物體內與一些無丙種球蛋白血癥等X染色體遺傳性疾病的發生密切相關[Tsukada?S.,Saffran?D.C.etal.,1993,Cell,72:279-290]。

由上可知，酪氨酸激酶作為一種細胞磷酸化蛋白在生物體內各種重要代謝調控過程中均起著極為重要的作用，其通過催化相關的蛋白的磷酸化來調控相關代謝途徑的進行。該蛋白的突變或表達異常將導致相關途徑的作用異常，從而引發各種相關的疾病。B細胞蛋白酪氨酸激酶是人體發現的一類新的蛋白酪氨酸激酶，該類蛋白的突變或表達異常通常導致相關細胞及組織代謝的異常，進而引發各種相關的代謝紊亂性型疾病。其在生物體內通常與X染色體相關的遺傳性疾病如無丙種球蛋白血癥、法布萊氏病、Alport綜合癥、相關的免疫缺陷型疾病及相關組織的腫瘤及癌癥等疾病的發生密切相關。該蛋白還可用于診斷及治療上述各種疾病。

通過基因芯片的分析發現，在胸腺、睪丸、肌肉、脾臟、肺、皮膚、甲狀腺、肝、PMA+的Ecv304細胞株、PMA-的Ecv304細胞株、未饑餓的L02細胞株、砷刺激1小時的L02細胞株、砷刺激6小時的L02細胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小腸、胎大腸、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎腎、胎脾、胎腦、胎肺以及胎心中，本發明的多肽的表達譜與人蛋白酪氨酸激酶的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人B細胞蛋白酪氨酸激酶13。

由于如上所述人B細胞蛋白酪氨酸激酶13蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人B細胞蛋白酪氨酸激酶13蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人B細胞蛋白酪氨酸激酶13蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人B細胞蛋白酪氨酸激酶13以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人B細胞蛋白酪氨酸激酶13的多核苷酸的重組載體。