[發明專利]一種新的多肽——CYP－60－18和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00115484.2
• 申請日: 2000-04-27
• 公開（公告）號: CN1320609A
• 公開（公告）日: 2001-11-07
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/00;C07K16/18;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽--CYP-60-18，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

親環蛋白和FK5?06結合蛋白(FKBP)是泛醌分子的不同家族，泛醌最初被發現是因為它能結合免疫抑制藥物環孢菌素A和FK506[Sigal,N.H.and?Dumont,F.J.1992,Annu.Rev.Immunol.10.,519-560][Fruman,D.A.,Burakoff,S.J.andBierer,B.E.1994,FASEB?J.8,391-400]。環孢菌素A和FK506在T細胞中所發揮的免疫抑制作用同時也作為初級免疫調節元素參與基因轉錄調節[Clipstone,N.A.and?Crabtr?ee,G.R.1992,NatuRe(London)357,695-697]。環孢菌素A的免疫抑制功能使得它被廣泛應用于器官移植，盡管目前還只限于腎臟[Kahan,B.D.(1989)Pharma?col.Rev.42,423-434]。親環蛋白和FKBP缺乏結構和序列一致性但都有肽基脯氨酸順反異構酶活性并可能參與蛋白質底物的折疊。

現已發現一種新的人類親環蛋白(CYP-60)是一種核特異性蛋白，表達于與免疫抑制核環孢菌素A毒性有關的細胞。作為親環蛋白家族的新成員，CYP-60有與其他親環蛋白家族成員高度同源，高度保守的序列，最可能是脯氨酸異構酶。位于389的酪氨酸是親環蛋白的多變氨基酸，位于121的色氨酸是與環孢菌素A反應的氨基酸是與環孢菌素結合的[Pflugl,G.,Kallen,J.,Schirmer,T.,etal.,1993,Nat?ure(Lodon)361,91-94]。

CYP-60廣泛表達于各種組織，但表達量最高的是胸腺、胰腺、精巢和K-562細胞系，腎臟。CYP-60亞細胞和組織分布表明它與環孢菌素活動有關。在轉染細胞，細胞系，正常組織片段和病理組織中發現CYP-60廣泛表達于核內。這個發現很有趣，是因為一些環孢菌素蛋白的免疫抑制作用對基因的調節發生于核水平。

本發明人的多肽與CYP-60在蛋白質水平上有48％的相同性和69％的相似性，并具有與CYP-60相似的序列特征，屬于CYP-60蛋白家族，故命名為CYP-60-18，同時推測其具有相似的生物學功能。

由于如上所述CYP-60-18蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的CYP-60-18蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新CYP-60-18蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽--CYP-60-18以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼CYP-60-18的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼CYP-60-18的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產CYP-60-18的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽--CYP-60-18的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽--CYP-60-18的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與CYP-60-18異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO:1中80-565位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO:1中1-826位的序列。