[發(fā)明專利]一種新的多肽——人含配對(duì)盒結(jié)構(gòu)域的蛋白20和編碼這種多肽的多核苷酸

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00115481.8
• 申請(qǐng)日: 2000-04-27
• 公開（公告）號(hào): CN1320634A
• 公開（公告）日: 2001-11-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/435
• 分類號(hào): C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，本發(fā)明描述了一種新的多肽--人含配對(duì)盒結(jié)構(gòu)域的蛋白20，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

配對(duì)盒結(jié)構(gòu)域是一由124個(gè)氨基酸殘基組成的高度保守的結(jié)構(gòu)域，人們從果蠅的分節(jié)配對(duì)蛋白、Pox-meso蛋白、Pox-neuro蛋白；哺乳動(dòng)物PAX蛋白家族的成員中均發(fā)現(xiàn)該結(jié)構(gòu)域的存在。這些蛋白通常在生物體的多種細(xì)胞分化、神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞發(fā)育、成肌細(xì)胞及生殖細(xì)胞發(fā)育過程中起重要的調(diào)控作用[Beat?W.Schafer,ThomasCzerny?et?al.,1994,Nucleic?Acids?Research,22:4574-4582]。

研究發(fā)現(xiàn)，配對(duì)盒結(jié)構(gòu)域通常存在于相關(guān)蛋白氨基酸序列的N末端，在一些蛋白中，該結(jié)構(gòu)域的上游區(qū)域還含有一同源異形盒結(jié)構(gòu)域。這兩個(gè)結(jié)構(gòu)域很可能在蛋白的作用過程中協(xié)同作用，以調(diào)控相關(guān)蛋白在體內(nèi)的表達(dá)及作用活性，進(jìn)而調(diào)控各種與之相關(guān)的代謝過程的進(jìn)行。

所有的含有該蛋白結(jié)構(gòu)域的蛋白，其配對(duì)盒結(jié)構(gòu)域的第35至51個(gè)氨基酸區(qū)域均含有一如下所示的高度保守的特征性序列片段：R-P-C-X(11)-C-V-S；該序列片段很可能是蛋白與其它相關(guān)蛋白相互作用，發(fā)揮調(diào)控作用的重要活性中心。該片段特殊位點(diǎn)的突變或表達(dá)異常將導(dǎo)致蛋白的作用異常及影響與之相關(guān)的生物體內(nèi)代謝過程的進(jìn)行，進(jìn)而引發(fā)各種相關(guān)的疾病。

由上可知，配對(duì)盒結(jié)構(gòu)域在生物體相關(guān)蛋白的作用過程中起著重要的調(diào)控作用。含有該結(jié)構(gòu)域的蛋白通常在分化細(xì)胞、神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞發(fā)育、運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)相關(guān)組織細(xì)胞、生殖細(xì)胞發(fā)育及一些免疫系統(tǒng)細(xì)胞的發(fā)育過程中高表達(dá)，這些蛋白通常在上述各種細(xì)胞的生長(zhǎng)及發(fā)育過程中起重要的調(diào)控作用。該類蛋白的突變或表達(dá)異常通常與生物體內(nèi)相關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育紊亂性疾病、生殖系統(tǒng)發(fā)育紊亂型疾病、相關(guān)組織的發(fā)育及代謝紊亂型疾病、運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)疾病、免疫系統(tǒng)疾病及一些惡性疾病的發(fā)生等均密切相關(guān)。該類蛋白還可用于診斷及治療上述各種疾病。

由于如上所述人含配對(duì)盒結(jié)構(gòu)域的蛋白20蛋白在機(jī)體內(nèi)重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人含配對(duì)盒結(jié)構(gòu)域的蛋白20蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人含配對(duì)盒結(jié)構(gòu)域的蛋白20蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽--人含配對(duì)盒結(jié)構(gòu)域的蛋白20以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼人含配對(duì)盒結(jié)構(gòu)域的蛋白20的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼人含配對(duì)盒結(jié)構(gòu)域的蛋白20的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供生產(chǎn)人含配對(duì)盒結(jié)構(gòu)域的蛋白20的方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供針對(duì)本發(fā)明的多肽--人含配對(duì)盒結(jié)構(gòu)域的蛋白20的抗體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了針對(duì)本發(fā)明多肽--人含配對(duì)盒結(jié)構(gòu)域的蛋白20的模擬化合物、拮抗劑、激動(dòng)劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供診斷治療與人含配對(duì)盒結(jié)構(gòu)域的蛋白20異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO:1中4-549位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO:1中1-1815位的序列。

本發(fā)明另外涉及一種含有本發(fā)明多核苷酸的載體，特別是表達(dá)載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細(xì)胞，包括轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)染的宿主細(xì)胞；一種包括培養(yǎng)所述宿主細(xì)胞和回收表達(dá)產(chǎn)物的制備本發(fā)明多肽的方法。

本發(fā)明還涉及一種能與本發(fā)明多肽特異性結(jié)合的抗體。