[發明專利]一種新的多肽——人血管形成素類似因子45和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00115287.4
• 申請日: 2000-03-29
• 公開（公告）號: CN1315451A
• 公開（公告）日: 2001-10-03
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽--人血管形成素類似因子45，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

血管生成是一個依賴于精確的正負調節平衡的過程，已發現的血管形成素1(angiopoietinl)的功能是誘導內皮細胞的Tie2受體酪氨酸激酶的表達，進而調控Tie2的水平，從而起到調控血管生成的作用。血管形成素2(angiopoietin2)是血管形成素1的競爭性抑制蛋白，它的過度表達會抑制血管的形成。血管形成素1和血管形成素2有著類似的結構特征，在氨基末端有一個coiled-coil功能域，在羧基末端有一個纖維原蛋白類似功能域。

研究表明，Tie家族包括兩個成員，Tiel和Tie2。它們優勢表達于血管內皮細胞和造血細胞中，被證明與DNA的合成有關。

血管形成素類似因子是一個糖基化的分泌蛋白，它的作用是通過自動分泌和副分泌作用，誘導內皮細胞的萌芽，從而起到對內皮細胞起重要的調控作用。目前，鼠的血管形成素類似因子已被克隆和研究。

血管形成素類似因子具有血管形成素的結構特征，在氨基末端存在coiled-coil功能域，在羧基末端存在纖維原蛋白類似功能域，這些在血管生成素中都是高度特異保守的。血管生成素類似因子還有兩個保守的糖基化位點，在氨基末端有一個高度疏水的結構區，這個結構區被認為是一個典型的分泌信號序列。

根據我們的研究，在成人的組織中，血管形成素類似因子廣泛表達，其中，編碼血管形成素類似因子的mRNA在心臟、小腸、脾和胃中表達量最高。在鼠的胚胎中，編碼鼠的血管形成素類似因子的mRNA在血管和骨骼肌組織中大量存在。這些結果證明，血管形成素類似因子在胚胎的血管形成過程中起重要作用。

與血管形成素不同的是，血管形成素類似因子并不與Tiel或Tie2結合，因此，可能存在還未被發現的血管形成素類似因子作用受體。

血管形成素類似因子與血管形成素、纖維原蛋白、凝集素蛋白一起，屬于纖維原蛋白家族，但從進化上看，血管形成素類似蛋白與血管形成素更為相近。

根據我們的研究，血管形成素類似因子可以通過自動分泌和副分泌作用，誘導內皮細胞的萌芽，刺激內皮細胞的分裂增殖，從而起到對內皮細胞起重要的調控作用

根據氨基酸同源比較的結果，本發明的多肽被推斷鑒定為人血管形成素類似因子45(angiopoietin-related?protein,HARP)。

由于如上所述人血管形成素類似因子45蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人血管形成素類似因子45蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人血管形成素類似因子45蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽--人血管形成素類似因子45以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人血管形成素類似因子45的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人血管形成素類似因子45的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人血管形成素類似因子45的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽--人血管形成素類似因子45的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽--人血管形成素類似因子45的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人血管形成素類似因子45異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少96％相同性的多核苷酸。