[發明專利]一種新的多肽——人淀粉類前體蛋白結合蛋白9和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00115261.0
• 申請日: 2000-03-29
• 公開（公告）號: CN1315439A
• 公開（公告）日: 2001-10-03
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人淀粉類前體蛋白結合蛋白9，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

阿爾茲海默氏癥(Alzheimer?disease)的特點是神經元數目減少，并且在腦內的β淀粉類小體增多。β淀粉類小體是由β淀粉類小體肽(beta-amyloidpeptide,AP)構成的。AP大小約4kDa，是由β-淀粉類前體蛋白β-amyloidprotein?precursor(APP)加工而成的可溶性蛋白水解產物。研究發現，當APP發生AD相關的突變時，會導致AP分泌的增加，或者AP_1-42/AP_1-40的比值發生變化。APP的超表達或者是包含AP結構域的APP的C末端的超表達對神經元有毒害作用。

APP在高爾基體中加工為成熟的蛋白質后運輸到細胞表面。之后或者被分泌出細胞外，或者成為內在蛋白固定在細胞膜上。APP起到一定的物質轉運的作用。例如，將APP的YENPTY序列切除就會影響細胞表面的APP的內吞作用，還會使APP在沒有到達細胞表面之前就進入細胞內途徑，從而打亂了細胞內物質的運輸。

APP的作用與幾種細胞因子有關。其中一種是FE65蛋白。FE65可以與APP的胞質端相結合。FE65在鼠腦中大量分布，在細胞內分布在內質網/高爾基體中。FE65可以增高結合到細胞表面的APP數量，還可以提高APP和AP的分泌量。【JBiol?Chem,Vol.274,Issue12,7952-7957,March?19,1999】

在人中發現了幾種APP的作用因子，其中一種為人hFE65L蛋白。該蛋白的C端部分可以與APP的胞質部分相互作用。對其結構的分析發現hFE65L包含幾個與信號傳遞和調節相關的結構域，暗示其與這類功能有關。并且hFE65L與鼠FE6?5L同源。【Proc?Natl?Acad?Sci?USA?1996?Oct?1；93(20):10832-7】

通過基因芯片的分析發現，在胸腺、睪丸、肌肉、脾臟、肺、皮膚、甲狀腺、肝、PMA+的Ecv304細胞株、PMA-的Ecv304細胞株、未饑餓的L02細胞株、砷刺激1小時的L02細胞株、砷刺激6小時的L02細胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小腸、胎大腸、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎腎、胎脾、胎腦、胎肺以及胎心中，本發明的多肽的表達譜與人淀粉類前體蛋白結合蛋白13的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人淀粉類前體蛋白結合蛋白9。由于如上所述人淀粉類前體蛋白結合蛋白9蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人淀粉類前體蛋白結合蛋白9蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人淀粉類前體蛋白結合蛋白9蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人淀粉類前體蛋白結合蛋白9以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人淀粉類前體蛋白結合蛋白9的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人淀粉類前體蛋白結合蛋白9的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人淀粉類前體蛋白結合蛋白9的方法。本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人淀粉類前體蛋白結合蛋白9的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人淀粉類前體蛋白結合蛋白9的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人淀粉類前體蛋白結合蛋白9異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。