[發(fā)明專利]一種新的多肽——人碳代謝副產(chǎn)物阻遏蛋白相關(guān)蛋白16和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00115260.2
• 申請日: 2000-03-29
• 公開（公告）號: CN1315438A
• 公開（公告）日: 2001-10-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——人碳代謝副產(chǎn)物阻遏蛋白相關(guān)蛋白16，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

碳代謝副產(chǎn)物阻遏蛋白(CCR4)是一種生物體內(nèi)普遍存在的轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白，通過在體內(nèi)形成多亞基復(fù)合物，它可以影響很多基因的表達(dá)。

研究發(fā)現(xiàn)，盡管CCR4并不結(jié)合于DNA，但它在與非正常的DNA結(jié)合功能域結(jié)合后可以刺激轉(zhuǎn)錄過程。與其他轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子相比，CCR4是受葡萄糖調(diào)節(jié)的。在兩個轉(zhuǎn)錄調(diào)控功能域中，一個是葡萄糖相關(guān)的，它包含有一個富含谷氨酸鹽-脯氨酸的結(jié)構(gòu)區(qū)，這與很多真核生物中發(fā)現(xiàn)的轉(zhuǎn)錄因子所含有的結(jié)構(gòu)區(qū)十分相似。研究發(fā)現(xiàn)，如CCR4缺少了亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)和C末端，則其兩個轉(zhuǎn)錄調(diào)控功能域不能組成有功能的CCR4。因此，亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)和C末端對于連接兩個轉(zhuǎn)錄調(diào)控功能域形成完整的CCR4有關(guān)鍵作用。(Mol?Cell?Biol?1994Jul；14(7):4522-31)

有進(jìn)一步的研究結(jié)果顯示，CCR4所含的亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)除了對形成完整的CCR4有作用外，還對CCR4與其相關(guān)蛋白相互結(jié)合作用有重要作用。(Mol?Cell?Biol1994?Jul；14(7):4522-31)；(Genetics?1992?Dec；132(4):951-62)

酵母的CCR4蛋白是一些非發(fā)酵生長的調(diào)控基因(如葡萄糖-抑制乙醇脫氫酶ADH2等)表達(dá)過程中不可缺少的一種蛋白，并且也是SPT6和SPT10突變基因的校正基因，而SPT6和SPT10對于保持染色質(zhì)的穩(wěn)定性有作用。(Mol?Cell?Biol?1994Jul；14(7):4522-31)

免疫沉淀反應(yīng)的結(jié)果表明，CCR4可以與至少4種蛋白形成復(fù)合物而起作用。(Mol?Cell?Biol?1994?Jul；14(7):4522-31)

CCR4相關(guān)蛋白——CAF1(POP2)是CCR4復(fù)合物的一種組成蛋白，它的同源蛋白在很多生物體內(nèi)已有發(fā)現(xiàn)，比如人，線蟲，爪蟾，鼠，酵母等等。CCR4相關(guān)蛋白(CAF1)在生物體內(nèi)的主要功能是調(diào)控轉(zhuǎn)錄過程。CCR4相關(guān)蛋白(CAF1)的具體結(jié)構(gòu)請參閱相關(guān)文獻(xiàn)。(Mol?Cell?Biol?1995?Jul；15(7):3487-95)

盡管對CCR4相關(guān)蛋白的結(jié)構(gòu)和功能的研究還不是十分清楚，但根據(jù)已有的研究，我們已經(jīng)知道CCR4相關(guān)蛋白的部分功能。

CCR4通過形成多亞基復(fù)合物，可以影響很多酵母中的基因的表達(dá)。細(xì)胞周期調(diào)節(jié)激酶(DBF2)在細(xì)胞有絲分裂末期向G1期過度的過程中有重要作用，DBF2與CCR4以及CAF-1/POP2共同形成復(fù)合物，在細(xì)胞周期的基因表達(dá)和后來的有絲分裂的基因轉(zhuǎn)錄過程中有重要作用。(EMBO?J?1997?Sep?1；16(17):5289-98)

人的B細(xì)胞移位蛋白(BTG1)是一種腫瘤抑制因子，因為其過度表達(dá)抑制了NIH?3T3細(xì)胞的增殖。碳代謝副產(chǎn)物阻遏蛋白(CCR4)的結(jié)合因子(hCAF-1)，是同源于鼠的CAF-1，釀酒酵母的CAF-1/POP2的。在體外，hCAF-1/BTG1復(fù)合物的形成依賴于BTG1(Ser-159)的p34cdc2激酶位點的磷酸化。hCAF-1/BTG1復(fù)合物對于細(xì)胞分裂和細(xì)胞增殖有重要且明顯的調(diào)控作用。(Biochem?J?1998?Dec?1；336(Pt?2):471-81)；(Wilcox,Scott,Subramanian,Ross,Adams-Burton,Stoltenborg?and?Corjay(1995)Circulation?92,I34-I35)

通過基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在胸腺、睪丸、肌肉、脾臟、肺、皮膚、甲狀腺、肝、PMA+的Ecv304細(xì)胞株、PMA-的Ecv304細(xì)胞株、未饑餓的L02細(xì)胞株、砷刺激1小時的L02細(xì)胞株、砷刺激6小時的L02細(xì)胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小腸、胎大腸、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎腎、胎脾、胎腦、胎肺以及胎心中，本發(fā)明的多肽的表達(dá)譜與人CCR4相關(guān)蛋白31的表達(dá)譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為人碳代謝副產(chǎn)物阻遏蛋白相關(guān)蛋白16。