[發明專利]一種新的多肽——人甲狀腺球蛋白12和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00115257.2
• 申請日: 2000-03-29
• 公開（公告）號: CN1315435A
• 公開（公告）日: 2001-10-03
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人甲狀腺球蛋白12，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

甲狀腺球蛋白(TG)是一種由甲狀腺產生的糖蛋白，作為一種活性激素左旋甲狀腺素以及三碘甲腺原氨酸的來源起作用，它支持甲狀腺激素的合成與貯存。上述激素形成自甲狀腺球蛋白的碘化酪氨酸部分，并通過甲狀腺球蛋白的蛋白酶解釋放到血液中。甲狀腺球蛋白(TG)含有內源三碘甲腺原氨酸(T.3.亞基)以及四碘甲腺原氨酸(T.4.亞基)殘基，還有與位于甲狀腺球蛋白多肽鏈上特定位置相連的內部肽。TG由甲狀腺產生，然后運到囊狀腔，在那里從碘化幾個酪氨酸殘基開始成熟，并伴隨一些碘代酪氨酸殘基。之后，通過胞吞進程，分子被吸入甲狀腺，并在其中的溶酶體中進行選擇性分裂，然后釋放甲狀腺激素并完成余下的分子降解(Y.Malthiery?et?al.,Eur.J.Biochem.165,491(1987))。

人甲狀腺球蛋白的結構對碘，功能性甲狀腺激素的產物的特異固定有關。在其氨基端側，70％的序列中有三種類型的重復單元，這三種類型的重復區域具同源性，其中共有18個重復序列，有四個酪氨酸殘基是形成甲狀腺素與三碘甲腺原氨酸的受體位點。余下30％的蛋白缺乏重復單元，但與加利福尼亞電鰩的乙酰膽堿酯酶有高度同源性。甲狀腺激素的合成位點聚集在蛋白的兩端，相對的，糖基化位點則散布于多肽鏈上(M.Henry?et?al.,Eur.J.Immunol.1992.22:315)。

甲狀腺球蛋白可用于治療與甲狀腺功能減退有關的疾病，例如呆小病，粘液性水腫以及尋常，原發性，繼發性和第三期甲狀腺功能減退(S.Lissitzky,Pharmacol.Ther.B2,219(1976))。此外，人甲狀腺素蛋白的免疫顯性區域位于分子的中心部分，其單克隆抗體的抗原決定部位對于診斷自身免疫性甲狀腺疾病是一種有效的探針。

通過基因芯片的分析發現，在胸腺、睪丸、肌肉、脾臟、肺、皮膚、甲狀腺、肝、PMA+的Ecv304細胞株、PMA-的Ecv304細胞株、未饑餓的L02細胞株、砷刺激1小時的L02細胞株、砷刺激6小時的L02細胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小腸、胎大腸、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎腎、胎脾、胎腦、胎肺以及胎心中，本發明的多肽的表達譜與人甲狀腺球蛋白9的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人甲狀腺球蛋白12。

由于如上所述人甲狀腺球蛋白12蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人甲狀腺球蛋白12蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人甲狀腺球蛋白12蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人甲狀腺球蛋白12以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人甲狀腺球蛋白12的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人甲狀腺球蛋白12的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人甲狀腺球蛋白12的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人甲狀腺球蛋白12的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人甲狀腺球蛋白12的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人甲狀腺球蛋白12異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO:1中84-401位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO:1中1-2566位的序列。