[發(fā)明專利]一種新的多肽——人過氧化酶18和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00115232.7
• 申請日: 2000-03-28
• 公開（公告）號: CN1315523A
• 公開（公告）日: 2001-10-03
• 發(fā)明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C12N15/53
• 分類號: C12N15/53;C12N9/08;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/26;C12Q1/68;A61K38/44
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本發(fā)明屬于生物技術領域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽--人過氧化酶18，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

過氧化氫(H2O2)是體內的一種主要的活性氧形式(ROS)。在需氧代謝過程中，過氧化氫的產出效率相當高。在一般的情況下，在線粒體中，NADH脫氫酶和呼吸鏈的泛半醌的中間步驟中，1-2％的氧可以被轉化成O2。超氧可以被線粒體的過氧化氫歧化酶轉化成過氧化氫。低濃度的過氧化氫會引發(fā)細胞凋亡，高濃度的過氧化氫會引起壞死。許多報道證明過氧化氫在在刺激劑(例如：神經酰胺、抗菌素A、亞醌酸鹽和腫瘤壞死因子等)引起的細胞毒和壞死中起重要作用。在人類的一些疾病如阿爾茲海墨氏癥、糖尿病、中風和AIDS癡呆綜合癥中也起一定作用。

在細胞內使細胞免受過氧化氫毒害的主要的酶防御系統(tǒng)是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)和過氧化氫酶。過氧化氫酶可以將過氧化氫轉化成H2O和O2。過氧化氫酶主要存在于細胞的過氧化物酶體中，在肝臟和紅細胞中活性最高，在腎臟和脂肪組織中次之，在肺和脾臟中活性中等，在心臟和腦中活性相當低。

在真核生物和一部分的原核生物中，過氧化氫酶由四個相同的亞基組成。每個亞基結合于一個血紅素Ⅸ基團。一個保守的色氨酸是血紅素的近中心配基，還包括一個保守的精氨酸也與血紅素結合相關。一個保守的組氨酸是催化所必須的。

通過基因芯片的分析發(fā)現，在胸腺、睪丸、肌肉、脾臟、肺、皮膚、甲狀腺、肝、PMA+的Ecv304細胞株、PMA-的Ecv304細胞株、未饑餓的L02細胞株、砷刺激1小時的L02細胞株、砷刺激6小時的L02細胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小腸、胎大腸、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎腎、胎脾、胎腦、胎肺以及胎心中，本發(fā)明的多肽的表達譜與人過氧化酶10的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為人過氧化酶18。

由于如上所述人過氧化酶18蛋白在調節(jié)細胞分裂和胚胎發(fā)育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人過氧化酶18蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人過氧化酶18蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽--人過氧化酶18以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼人過氧化酶18的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼人過氧化酶18的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產人過氧化酶18的方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽--人過氧化酶18的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽--人過氧化酶18的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與人過氧化酶18異常相關的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO:1中1929-2453位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO:1中1-2947位的序列。

本發(fā)明另外涉及一種含有本發(fā)明多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養(yǎng)所述宿主細胞和回收表達產物的制備本發(fā)明多肽的方法。

本發(fā)明還涉及一種能與本發(fā)明多肽特異性結合的抗體。

本發(fā)明還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制人過氧化酶18蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本發(fā)明的多肽。本發(fā)明還涉及用該方法獲得的化合物。