[發(fā)明專利]一種新的多肽——人子宮珠蛋白58和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00115221.1
• 申請(qǐng)日: 2000-03-28
• 公開（公告）號(hào): CN1315414A
• 公開（公告）日: 2001-10-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/435
• 分類號(hào): C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽--人子宮珠蛋白58，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

子宮珠蛋白最早是從兔子子宮中得到，是一種含有70個(gè)氨基酸的球狀蛋白，它能特異性地以高親合力結(jié)合孕酮，同時(shí)也是磷酸脂酶A2的抑制劑。此外，人Clara細(xì)胞的磷脂結(jié)合蛋白(CCPBP)、家貓的主要變態(tài)反應(yīng)原I的第一鏈(felDI)、人乳腺珠蛋白、鼠前列腺類固醇結(jié)合蛋白等都與子宮珠蛋白有較為類似功能，它們的氨基酸序列中都含有一段較為保守的序列：[DEQ]-X(4)-[SN]-X(5)-[DEQ]-X-I-X(2)-S-[PSE]-[LS]-C。

通常子宮珠蛋白家族以二聚物的形式形成功能結(jié)構(gòu)域，兩條獨(dú)立多肽鏈A、B通過兩條二硫鍵(3SG(A)-69SG(B)和69SG(A)-3SG(B))反平行地連接。每條多肽鏈扭曲卷繞成4個(gè)α-螺旋結(jié)構(gòu)。在各個(gè)α-螺旋之間及其尾部連接有小段線性蛋白或β-旋轉(zhuǎn)蛋白結(jié)構(gòu)。

子宮珠蛋白家族與其它球狀蛋白一樣，疏水性殘基全部或部分埋藏在蛋白內(nèi)部，親水性殘基暴露在表面。A、B兩條多肽鏈通過二硫鍵相互結(jié)合，在空間上形成的一個(gè)疏水腔結(jié)構(gòu)。當(dāng)二硫鍵還原時(shí)，兩條單體鏈的氨基端和羧基端形成一條通道，使結(jié)合物能夠自由進(jìn)出疏水腔，產(chǎn)生結(jié)合活性，兩個(gè)二硫鍵在整個(gè)機(jī)制中起著封閉和開啟通道的作用。

子宮珠蛋白家族通過獨(dú)特的疏水性腔特異性結(jié)合孕酮、類固醇、磷脂等化合物，也是磷酸脂酶A2的抑制劑。子宮珠蛋白家族是一類較為重要的免疫調(diào)節(jié)蛋白，同時(shí)在一些癌癥的形成過程中起著較為關(guān)鍵的作用。

通過基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在胸腺、睪丸、肌肉、脾臟、肺、皮膚、甲狀腺、肝、PMA+的Ecv304細(xì)胞株、PMA-的Ecv304細(xì)胞株、未饑餓的L02細(xì)胞株、砷刺激1小時(shí)的L02細(xì)胞株、砷刺激6小時(shí)的L02細(xì)胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小腸、胎大腸、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎腎、胎脾、胎腦、胎肺以及胎心中，本發(fā)明的多肽的表達(dá)譜與人子宮珠蛋白13的表達(dá)譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為人子宮珠蛋白58。

由于如上所述人子宮珠蛋白58蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人子宮珠蛋白58蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人子宮珠蛋白58蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽--人子宮珠蛋白58以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼人子宮珠蛋白58的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼人子宮珠蛋白58的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供生產(chǎn)人子宮珠蛋白58的方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供針對(duì)本發(fā)明的多肽--人子宮珠蛋白58的抗體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了針對(duì)本發(fā)明多肽--人子宮珠蛋白58的模擬化合物、拮抗劑、激動(dòng)劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供診斷治療與人子宮珠蛋白58異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO:1中44-388位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO:1中1-2901位的序列。

本發(fā)明另外涉及一種含有本發(fā)明多核苷酸的載體，特別是表達(dá)載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細(xì)胞，包括轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)染的宿主細(xì)胞；一種包括培養(yǎng)所述宿主細(xì)胞和回收表達(dá)產(chǎn)物的制備本發(fā)明多肽的方法。

本發(fā)明還涉及一種能與本發(fā)明多肽特異性結(jié)合的抗體。