[發明專利]一種新的多肽——L1逆轉錄因子46和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00115209.2
• 申請日: 2000-03-28
• 公開（公告）號: CN1315337A
• 公開（公告）日: 2001-10-03
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/00;C07K16/18;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽--L1逆轉錄因子46，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

人類主要的基因組是由一些分散在各個不同家族的重復序列所構成的唯一的DNA序列簇組成[Kole,L.B.,aynes,S.R.,etal.,1983,J.Mol.Biol.165,257-286]。這些分散的重復序列可以按照他們的基因型長度來分類[Singer,M.F.1982,Int.Rev.Cyt?ol.76,113-193]。那些短的分散重復序列所組成的家族例如Alu重復子被歸為SINE家族，相應地由長的分散重復序列所組成的家族則被歸為LINE家族。

人類長的分散重復序列LINE-1(L1)組成了一個高度重復的但缺乏長末端重復序列的DNA家族。到目前為止SINE和LINE?DNA在基因組中的功能還不是很清楚。一些L1元素在哺乳動物基因組中能調節逆轉錄倒位[Dombro?ski,B.A.,Scott,A.F.,et?al.,1993,Proc.Natl.Acad.Sci.USA90,6513-6517]。L1序列的特征是在3’末端富含A,5’端縮減以及含有重要意義的長的開放閱讀框。完整的L1序列長6.5kb包含兩個開放閱讀框(ORF1,ORF2)。ORF1編碼一個尚未知功能的40kDa蛋白，ORF2包含一個與逆轉錄有關的序列區域[Mathia?s,S.L.,Scot?t,A.F.,1991,Science254,1808-1810]。在已分析的所有哺乳動物中所有的L1開放閱讀框及其所編碼的相應的肽段都同源?，F在已發現許多實體瘤和瘤細胞系的L1具有轉錄活性[Bratthauer,G.L.,Cardiff,R.D.,etal.,1994,Cancer?73,2333-2336]。L1作為轉錄子和核因子結合元素是內部的順式作用元件[Minakami,R.,Kurose,et?al.,1992,Nucleic?AcidsRes.20,3139-3145]。這些證據表明L1蛋白的轉錄功能可能是細胞增殖所必須的。

L1DNA元素在人類基因組以及嚙齒類細胞中是常見的，但是L1轉錄子的轉錄作用卻可能是人類特異性的。因為L1轉錄子在人類細胞中大量表達，在所有人類染色體L1的逆轉錄倒位片段可能對加速DNA非正常雜交以及一些特殊的基因的染色體缺失起著非常重要的作用[Kou-Wha?Kuo,Hamm-MinG?et?al.,1998,BiochemBiophys?Res?Commun,253(3):566-570]。

本發明人的多肽與L1蛋白的ORF2區域在蛋白質水平上有92％的相同性和94％的相似性，并具有與L1蛋白ORF2區域相似的序列特征，因為L1蛋白ORF2區域與逆轉錄有關，故命名為L1逆轉錄因子46，并推測其具有相似的生物學功能。由于如上所述L1逆轉錄因子46蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的L1逆轉錄因子46蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新L1逆轉錄因子46蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽--L1逆轉錄因子46以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼L1逆轉錄因子46的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼L1逆轉錄因子46的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產L1逆轉錄因子46的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽--L1逆轉錄因子46的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽--L1逆轉錄因子46的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與L1逆轉錄因子46異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；