[發(fā)明專利]一種新的多肽——CYP2J2－36和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00115170.3
• 申請日: 2000-03-27
• 公開（公告）號: CN1315335A
• 公開（公告）日: 2001-10-03
• 發(fā)明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明屬于生物技術領域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽--CYP2J2-36，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

花生四烯酸是許多生長因子、荷爾蒙和細胞因子的刺激因子，是一個重要的細胞內(nèi)第二信使[Jian-Kang?Chen,Dao-WenWang,1999,J.Biol.Chem.274(8):4764-4769]。P450在花生四烯酸中依賴于NADPH的環(huán)氧化作用中所起的作用已經(jīng)被很好地證明[Capdevila,J.H.,Chacos,N.,Werringloer?et?al.,1981,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.78,5362-5366][Oliw,E.H.,Lawson,J.A.,et?al.,1981,J.Biol.Chem.256,9924-9931]。花生四烯酸的環(huán)氧化作用發(fā)生于好幾種器官，如肝臟、腎臟、肺等[Capdevila,J.H.,Wei,S.,Yan,J.,et?al.,1992,J.Biol.Chem.267,21720-21726]。花生四烯酸的環(huán)氧化反應呈對花柱型，這種反應的不對稱性是P450酶所獨有的，并且多數(shù)環(huán)氧化酶屬于CYP2基因家族[Zeldin,D.C.,DuBo?is,R.N.,etal.,1995,Arch.Biochem.Biophys.,322,76-86]。表達于肝臟、腎臟、肺和血漿的內(nèi)生性EET的手性特征確定了花生四烯酸的生物合成起源以及微體P450在花生四烯酸生物活性中所起的內(nèi)生性作用[Karara,A.,Wei,S.,Spady?etal.,1992,Biochem.Biophys.Res.Commun.182,1320-1325]。

EET參與調(diào)節(jié)許多生化反應，這些生化反應包括對膜流動性的調(diào)節(jié)，刺激荷爾蒙釋放以及作用平滑肌，正是因為這些生化反應使得環(huán)氧化酶催化的環(huán)氧化作用非常重要。

目前已發(fā)現(xiàn)一個新的P450花生四烯酸單加氧酶(P450花生四烯酸環(huán)氧化酶)高表達于人的心臟，同時亦發(fā)現(xiàn)人的心臟也包含大量的EET。這個新發(fā)現(xiàn)的P450花生四烯酸單加氧酶取名為CYP2J2。

CYP2J2高表達于心臟，而在肝臟、腎臟中少有表達，在腦和卵巢中幾乎沒有表達[Shu?Wu,Cindy?RMoomaw?et?al.,1996,J.Biol.Chem.271(7):3460-3468]。

本發(fā)明人的多肽與CYP2J2在蛋白質(zhì)水平上有45％的相同性和62％的相似性，并具有與CYP2J2相似的序列特征，屬于CYP2J2蛋白家族，故命名為CYP2J2-36,并推測其具有相似的生物學功能。

由于如上所述CYP2J2-36蛋白在調(diào)節(jié)細胞分裂和胚胎發(fā)育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的CYP2J2-36蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新CYP2J2-36蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽--CYP2J2-36以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼CYP2J2-36的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼CYP2J2-36的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產(chǎn)CYP2J2-36的方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽--CYP2J2-36的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽--CYP2J2-36的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與CYP2J2-36異常相關的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。