[發明專利]一種新的多肽——人rjs相關蛋白94和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00115138.X
• 申請日: 2000-03-27
• 公開（公告）號: CN1315367A
• 公開（公告）日: 2001-10-03
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽--人rjs相關蛋白94，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

在哺乳動物基因組中，結膜炎稀釋位點p的突變表現為色素沉著。對鼠進行針對性研究發現，這種突變導致的性狀變化范圍很廣，癥狀包括皮毛顏色輕微偏淺(黑色眼睛)至幾乎完全缺少黑色素(粉紅色眼睛)(Silvers,W.K.,1979)不等。在射線的誘導下也能引起p位點突變，還發現p的等位基因p(6H)、p(25H)和p(BS)與一些顯性性狀有關，主要包括生長緩慢、步態不平穩、雄性不育、雌性半數不育以及母性行為失常(Hollander,W.F.,Bryan,H.D.et?al.,1960；Wolfe,H.G.,1973)。與上述顯性性狀相關的位點稱為rjs(runty,jerky,sterile)。

rjs編碼的氨基酸序列包含一些重要的功能性區域：RCC1(染色體濃縮調節器)，細胞色素b5和E6-AP泛素連接酶共同形成的一個HECT區域(Renault,L.,Nassar,N.et?al.,1998)。RCC1可作為一種小的GTP結合蛋白的鳥嘌呤核苷轉換器(GEF)；細胞色素b5位于細胞膜上，它作為一些膜束縛的加氧酶的電子載體起作用，在其催化區域含有兩個保守的His殘基；E6-AP是一種E3泛素-蛋白連接酶。

rjs基因的cDNA非常巨大，大約包含15264個核苷酸，但rjs編碼蛋白含有4836個氨基酸殘基，其中存在有三個RCC1重復結構以及一個細胞色素b5和E6-AP泛素連接酶共有的HECT區域。在人類基因組中還存在與之相同源的其它基因，典型的如HSC7541和KIAA0393，位于染色體15q11-q13上。HSC7541和KIAA0393接近或包含在一個區域中，而這個區域在大多數Prader-Willi綜合癥病人中缺失(Lehman?A.L.,Nakatsu?Y.,Ching?A.,Bronson?R.T.et?al.,1998)。p位點突變引起的rjs鼠生長減緩在出生時就很明顯，并且一直可持續到成年階段。

本發明的多肽與上述的p位點突變導致的rjs相關蛋白有36％的相同性，51％的相似性，并且包含rjs相關蛋白特征性的保守序列，因此認為此蛋白是一種新的rjs相關蛋白，具有與之相似的生物學功能，并命名為人rjs相關蛋白94。

由于如上所述人rjs相關蛋白94蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人rjs相關蛋白94蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人rjs相關蛋白94蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽--人rjs相關蛋白94以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人rjs相關蛋白94的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人rjs相關蛋白94的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人rjs相關蛋白94的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽--人rjs相關蛋白94的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽--人rjs相關蛋白94的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人rjs相關蛋白94異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO:1中180-2756位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO:1中1-3238位的序列。