[發明專利]一種新的多肽——前列腺特異性膜抗原16和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00114986.5
• 申請日: 2000-03-17
• 公開（公告）號: CN1314361A
• 公開（公告）日: 2001-09-26
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/00;C07K16/18;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——前列腺特異性膜抗原16，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

器官特異性抗原能“發現”只發生于一個特異性組織的反應。前列腺是一個非常不一般的器官，隨著年齡的增加大多數器官會發生萎縮，而前列腺腺體卻一直增大，在大多數病例中最終發展為惡性腫瘤。

前列腺癌是男性中最常見的惡性腫瘤疾病，在導致男性死亡的癌癥中位居第二[Chiarodo,A.(1991)Cancer?Res.,51:2498-2505]。前列腺癌有很多種不同的表現形式，從慢慢地產生到無痛地惡化，再到發展為不應轉移性疾病，最后向骨轉移。PAP是最早發現的診斷前列腺癌轉移擴散的免疫血清之一，現在則用PSA代替。PSA與腫瘤有關，是癌細胞轉移的指示劑，并且為前列腺癌病人手術、放射以及男性激素消融治療提供參數。所有這些蛋白質都分泌在血清和前列腺中并且可以測出。來源于一個有荷爾蒙不應前列腺癌的前期治療病人的轉移性淋巴結LNCaP人前列腺癌細胞系已經建立起來[Horoszewicz,J.S.,Leong,S.S.,etal.,(1983)Cancer?Res.,43∶1809-1818]。該細胞系被認為是研究體內前列腺癌細胞的最好模型，因為它有男性染色體核型的非整倍體，保持了前列腺的分化功能，而該功能又能產生PAP和PSA并且高表達的男性激素受體。從該細胞系中分離出的細胞膜去免疫小鼠產生雜交瘤。用小鼠的脾細胞和LNCaP細胞膜免疫能產生一個前列腺特異性單克隆抗體，命名為7E11-C5。該單克隆抗體與LNCaP細胞膜結合非常緊密。所有良性和贅生前列腺細胞都表現陽性，而惡性腫瘤則表現更多的陽性。淋巴結和骨轉移也對該抗體表現陽性，尤其在荷爾蒙-不應損傷中有高表達[Axelrod,H.R.,Gilman,S.C.,et?al.,(1992)AUA?Proceedings.Abstract596,1992]。

7E11-C5的抗原決定簇包括一個抗原的一個糖類部分，這個抗原的分子量大約是100,000kDa[Abdel-Nabi,H.,Wright,G.L.,etal.,(1992)Semin.Urol.,10:45-54]。我們把該抗原叫做前列腺特異性膜抗原PSM。

PSM抗原呈現出許多有趣而有意義的特征。位于跨膜區域N末端的3個精氨酸殘基表明該蛋白屬于類型Ⅱ整合膜蛋白，還有一個短的N末端區域位于膜的細胞質側，一個大的C末端結構域位于分子外側[vonHeijine,G.Biochim.Biophys.Acta,947:307-333,1988]。作為唯一的前列腺上皮細胞的整合膜蛋白，PSM抗原或其一部分可以作為觀察轉移堆積的理想位點。

通過基因芯片的分析發現，在胸腺、睪丸、肌肉、脾臟、肺、皮膚、甲狀腺、肝、PMA+的Ecv304細胞株、PMA-的Ecv304細胞株、未饑餓的L02細胞株、砷刺激1小時的L02細胞株以及前列腺組織中，本發明的多肽的表達譜與前列腺特異性膜抗原的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為前列腺特異性膜抗原16。

由于如上所述前列腺特異性膜抗原16蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的前列腺特異性膜抗原16蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新前列腺特異性膜抗原16蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——前列腺特異性膜抗原16以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼前列腺特異性膜抗原16的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼前列腺特異性膜抗原16的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產前列腺特異性膜抗原16的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——前列腺特異性膜抗原16的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——前列腺特異性膜抗原16的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與前列腺特異性膜抗原16異常相關的疾病的方法。