[發明專利]一種新的多肽——人螺旋－環－螺旋蛋白17和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00114974.1
• 申請日: 2000-03-17
• 公開（公告）號: CN1314365A
• 公開（公告）日: 2001-09-26
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人螺旋-環-螺旋蛋白17，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

在哺乳動物中，細胞的分化是與DNA-蛋白相互作用密切相關的。這種蛋白與DNA的特定序列相結合，調節基因的表達。其中一類是包含基本螺旋-環-螺旋(basic-helix-loop-helix,B-HLH)結構域的蛋白這類蛋白包括肌蛋白類的調節因子MyoD,myogenin,myf5和MRF4/herculin/myf6等。這種肌蛋白類的調節因子可以與另一種B-HLH蛋白，E蛋白，結合形成異質寡聚物。形成的異質寡聚物可以通過它們的轉錄因子的作用來調節肌肉細胞的分化。[Nature,346:663-665]

HEB也是一種B-HLH因子，其螺旋-環-螺旋結構與一種由E2A基因和ITF2基因免疫球蛋白增強子結合蛋白(E蛋白)幾乎完全一樣，是E蛋白家族的第三個成員，這三種蛋白都可以作為同型寡聚物與E盒結合。它們還可以與MYOGENIN形成異質寡聚物。另外，HEB還可以與E12和ITF2蛋白形成異質寡聚物。在異質寡聚化之后，其DNA結合特異性和解離效率都會發生變化。例如：肌源因子本身并不能作為同型寡聚物與特定的肌肉特異的增強子的E盒結合，但當其與E蛋白形成異質寡聚物之后就可以與之結合。這種結合活性又可以被另一種HLH蛋白Id負調控。

HEB在骨骼肌、胸腺和B細胞株等多種組織和細胞株中都有表達。因此其所起的調控作用可能不限于骨骼肌。例如：HEB異質寡聚物和一種E12相關蛋白可以與CD4增強子相互作用而調節CD4在T細胞中的表達。[mol.cell.bio,sept.1993,620-5628]HEB還可以與myogenin和E12等形成異質寡聚物。HEB可以通過與E盒結合而刺激基因的表達，調節細胞分化。有幾種表達HEB蛋白的細胞還會形成調節復合物進一步促進細胞分化狀態的形成。[mol.cell.bio,Mar.1992,1031-1042]

通過基因芯片的分析發現，在胸腺、睪丸、肌肉、脾臟、肺、皮膚、甲狀腺、肝、PMA+的Ecv304細胞株、PMA-的Ecv304細胞株、未饑餓的L02細胞株、砷刺激1小時的L02細胞株以及前列腺組織中，本發明的多肽的表達譜與人螺旋-環-螺旋蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人螺旋-環-螺旋蛋白17。

由于如上所述人螺旋-環-螺旋蛋白17蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人螺旋-環-螺旋蛋白17蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人螺旋-環-螺旋蛋白17蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人螺旋-環-螺旋蛋白17以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人螺旋-環-螺旋蛋白17的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人螺旋-環-螺旋蛋白17的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人螺旋-環-螺旋蛋白17的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人螺旋-環-螺旋蛋白17的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人螺旋-環-螺旋蛋白17的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人螺旋-環-螺旋蛋白17異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。