[發明專利]一種新的人蛋白翻譯起始因子蛋白及其編碼序列

無效

• 申請號: 00114960.1
• 申請日: 2000-03-17
• 公開（公告）號: CN1269411A
• 公開（公告）日: 2000-10-11
• 發明（設計）人: 肖華勝;劉鋒;宋懷東;高國鋒;陳竺;韓澤廣
• 申請（專利權）人: 國家人類基因組南方研究中心
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C07K14/435;C07K16/18;C07H21/00;C12Q1/68
• 代理公司: 復旦大學專利事務所
• 代理人: 陸飛

本發明涉及分子生物學、蛋白學、生理學以及基因工程等領域。具體地，本發明涉及一種在人類嗜鉻細胞瘤中表達的heIF3-iso蛋白及其核酸序列。本發明還涉及該蛋白和核酸序列的制備方法和用途。

生物體的許多功能都是通過蛋白質來實現的，對于大多數生物而言，DNA轉錄形成mRNA，以mRNA為模板翻譯成為蛋白質，因此蛋白質翻譯在基因表達的調控中起著相當重要的作用。蛋白質翻譯的起始與眾多的起始因子有關，在真核生物中，目前已經發現了12個翻譯起始因子(Eukaryotic?translation?initiation?factors，eIFs)：eIF1A，eIF2，eIF2B，eIF2C，eIF3，eIF4A，eIF4B，eIF4E，eIF4G，eIF5以及eIF6。(Int?J?Biochem?Cell?Biol.1997?Oct；29(10)：1127-31.Review)。

本發明中，我們在人嗜鉻細胞瘤中克隆到人eIF3基因的同源基因heIF3-iso。

在本發明被公布之前，尚未有任何公開或報道過本專利申請中提及的人類heIF3-iso蛋白序列及其核酸序列。

本發明的第一目的就是提供一種新的人基因heIF3-iso(Genbank?AccessionNo.AF212241)，該基因是一個人heIF3-iso蛋白基因。

本發明的第二目的是提供一種新的人蛋白heIF3-iso。

本發明的第三目的是提供一種利用重組技術生產上述的新的人heIF3-iso蛋白和核酸序列的方法。

本發明還提供了這種人heIF3-iso蛋白多肽和編碼序列的應用。

在本發明的一個方面，提供了一種分離出的DNA分子，該分子包括：編碼具有人heIF3-iso蛋白質活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列與SEQ?ID?NO.6中從核苷酸第3-1832位DNA分子的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度嚴緊條件下與SEQ?ID?NO.6中從核苷酸第3-1832位的核苷酸序列雜交。較佳地，所述的序列編碼具有SEQ?ID?NO.7所示的氨基酸序列的多肽。更佳地，所述的序列具有SEQ?ID?NO.6中從核苷酸第3-1832位的核苷酸序列。

在本發明的另一方面，提供了一種分離出的人heIF3-iso蛋白質多肽，它包括：具有SEQ?ID?NO.7氨基酸序列的多肽、或其保守性變異多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO.7序列的多肽。

在本發明的另一方面，還提供了一種載體，它包含上述的DNA分子。

在本發明的另一方面，還提供了一種用上述載體轉化的宿主細胞。在一個實例中該宿主細胞是大腸桿菌；在另一實例中，該宿主細胞是真核細胞。

在本發明的另一方面，還提供了一種產生具有人heIF3-iso蛋白質活性的多肽的方法，其步驟如下：

(1)將編碼具有人heIF3-iso蛋白活性的多肽的核苷酸序列可操作地連于表達調控序列，形成人heIF3-iso蛋白表達載體，所述的核苷酸序列與SEQ?ID?NO.6中從核苷酸第3-1832位的核苷酸序列有至少70％的同源性；

(2)將步驟(1)中的表達載體轉入宿主細胞，形成人heIF3-iso蛋白的重組細胞；

(3)在適合表達人heIF3-iso蛋白多肽的條件下，培養步驟(2)中的重組細胞；

(4)分離出具有人heIF3-iso蛋白活性的多肽。

較佳地，在該方法中使用的核酸序列具有SEQ?ID?NO.6中第3-1832位的序列。

本發明還提供了與heIF3-iso蛋白多肽特異性結合的抗體。

在本發明中，“分離的”、“純化的”或“基本純的”DNA是指，該DNA或片段已從天然狀態下位于其兩側的序列中分離出來，還指該DNA或片段已經與天然狀態下伴隨核酸的組份分開，而且已經與在細胞中伴隨其的蛋白質分開。