[發明專利]一種經分離篩選的屎腸球菌純培養物及其應用

無效

• 申請號: 00114138.4
• 申請日: 2000-03-21
• 公開（公告）號: CN1314466A
• 公開（公告）日: 2001-09-26
• 發明（設計）人: 謝明權;陳莊;陳平潔;廖玲;禹慧敏
• 申請（專利權）人: 廣東省農業科學院畜牧研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K35/74;//;C12R101)
• 代理公司: 廣東專利事務所
• 代理人: 何海帆

本發明涉及一種經分離篩選的屎腸球菌(Enterococcus?faecium)的純培養物及其應用，該純培養物已于二零零零年一月二十五日由武漢大學中國典型培養物保藏中心保藏，其保藏編號為CCTCC?NO:M99016。

屎腸球菌(Enterococcus?faecium)廣泛存在于自然界，也是畜禽胃腸道中的正常菌群。屎腸球菌能通過抑制動物胃腸道致病性細菌如大腸桿菌、沙門氏桿菌等，促進有益微生物的定植，調節動物的微生態平衡(參考文獻：《中國微生態學雜志》，1998,10(1):59～60；《Food?Science?and?Technology?Today》,1998,12(1):46-50；《動物微生態學》，1994年第一版，北京：中國農業出版社；《腸道微生物》，1996年臺灣養豬科學研究所出版；《生物技術在飼料工業中的應用》，1995年第一版，北京：中國農業出版社；《動物醫學進展》，1997,18(1):38-41；《J.Appl.Bacteriol》,1989,66:365-378；《Annual?reviews?inmicrobiology》,1977,31:107-133；《J.Appl.Bacteriol》,1996,81(5):474～480)。屎腸球菌可用常規菌種分離方法分離，但對屎腸球菌及其在畜禽胃腸道微生態調節的作用研究較少，對屎腸球菌作為畜禽胃腸道微生態調節劑的研究，如其耐酸性、耐膽鹽特性、耐熱性、安全性等則未發現。

本發明的第一個目的是提供一種能應用于制造畜禽胃腸道微生態調節劑的屎腸球菌純培養物。

本發明的第二個目的是應用上述菌種制造仔豬胃腸道微生態調節劑。

本發明的第一個目的是這樣實現的：其包括，培養基選擇、糞便樣品采集、接種及培養篩選，其特征在于：經膽汁耐受性篩選檢測證實能耐受30％～40％膽汁；經耐酸性篩選檢測證實在pH3.0條件下保溫2小時，存活率為1.4％；經安全性篩選檢測證實無害。選擇KF培養基(參考文獻：現代細菌學培養基和生化試驗手冊，1992年第一版，北京：中國科學技術出版社)，采集豬的新鮮糞便，適當稀釋后接種于KF培養基平板，置燭缸內45℃培養18-24小時，挑菌落，純化后經全自動細菌分析儀(美國VITEC全自動細菌分析儀)篩選鑒定。由于用作微生態調節劑的微生物菌株需要有較好的耐酸、耐6.5％氯化鈉及耐膽汁特性，保證菌株在胃腸道內不失活，經40％膽汁、6.5％氯化鈉和耐酸性篩選檢測(參考文獻：動物源乳桿菌篩選及生物特性參數測定《江蘇農學院學報》，1997,18(1):1-5；Comparison?of?the?bile?salts?and?sodium?dodecyl?sulfate?stressresponses?in?Enterococcus?faecalis?《Applied?and?Environmental?Microbiology》,1996,62(7):2416-2420)，從鑒定出的屎腸球菌純培養物中進一步篩選出耐膽汁、耐酸和能在6.5％氯化鈉條件下正常生長的屎腸球菌純培養物。將含有10⁸和10⁹cfu/ml活菌的發酵液分別給1日齡健康雛雞腹腔注射和口服，在整個試驗期內未發現任何毒副作用。